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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

전자기장 발생에 의한 유전자치료법 및 그 치료장치

인체에 전류 등 제요소를 결합한 전자기장을 발생시켜 병변 유전자 등을 정상 유전자로 복원시키는 유전자 치료기술 및 그 치료장치의 개발기술유전자에 대한 조작이나 시술을 하지 않고 인체의 유전자 발현체계를 가동시켜 치료하는 장치로서 안전성이나 윤리성에 문제가 없음.

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특허법인충정
등록일
2000-01-17
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

전자기장 발생에 의한 유전자치료법 및 그 치료장치

인체에 전류 등 제요소를 결합한 전자기장을 발생시켜 병변 유전자 등을 정상 유전자로 복원시키는 유전자 치료기술 및 그 치료장치의 개발기술유전자에 대한 조작이나 시술을 하지 않고 인체의 유전자 발현체계를 가동시켜 치료하는 장치로서 안전성이나 윤리성에 문제가 없음.

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한국기술거래(주)
등록일
2000-01-17
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

재조합 대장균에 의한 생분해성 고분자 PHA 생산

폐플라스틱으로인한 환경문제가 심각히 인식되면서, 완전 생분해성이며 기존의 합성 고분자와의 유사한 물성을 갖고 있는 Polyhydroxyalkanoates (PHAs)는 기존의 석유합성 플라스틱의 대체 물질로써 현재 전세계적으로 연구의 대상이 되고 있다. 하지만 생분해성 고분자 PHAs는 아직까지 높은 생산 단가로 인하여 상용화에 어려움을 겪고 있다. 이러한 높은 생산 단가를 낮추기 위한 연구로, 유전자 재조합 기술을 이용한 재조합 대장균에의한 PHA 생산 연구가 한국과학기술원 화학공학과 이상엽 교수에 의해 수행되었다. Alcaligenes eutrophus의 PHA 생합성 유전자를 자기 복제능이 있는 플라즈미드 DNA에 끼우고 이것을 대장균에 넣어 탄소원이 첨가된 배지에서 대량증식하여 PHAs중에서 대표적인 Poly(3-hydroxybutyrate) [P(3HB)]를 생산정제하였다. 이를 위하여 안정화된 높은 복제수의 플라즈미드를 개발하였고, 이러한 개발된 플라즈미드를 가지고 여러 대장균을 형질 전환하여 최적의 재조합 균주를 선택하였고, 그 균주를 이용하여 P(3HB) 합성을 연구하였다. 또한 P(3HB) 생산단가에서 가장 큰 비중을 차지하고 있는 기질 및 배지의 생산 단가를 낮추기 위하여 저렴한 단순 배지를 사용한 P(3HB) 생산을 연구하였다. 또한 재조합 대장균이 P(3HB)를 합성할 경우 세포분열이 억제되어 균체가 신장되어지는 현상(필라멘테이션)을 발견하여, 이러한 필라멘테이션이 억제된 재조합 대장균을 개발하였다. 그 결과 저가의 단순배지에서, 지금까지 재조합 대장균을 이용한 P(3HB)의 생산에서 얻어진 가장 높은 값인 149 g/L의 세포농도, 104 g/L의 P(3HB) 농도를 51시간 만에 얻었다. 이러한 연구와 함께 보다 저가의 탄소원을 이용하여 재조합 대장균에서 P(3HB)를 생산하려는 연구도 시행중이다.현재 재조합 대장균을 이용한 P(3HB) 생산 기술을 이용할 경우 P(3HB)의 생산 단가를 kg당 $ 4 이하로 낮출 수 있으며, glucose 대신에 저가의 탄소원을 쓸 경우에는 그 이하의 생산 단가를 얻을 수 있다.

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한국기술거래(주)
등록일
2000-01-17
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

신규유전자 탐색.기질세포 유전자 판넬의 개발과 이를 이용한 암전이 유전자 검색

본 연구는 지금까지 연구가 체계적으로 이루어지지 않고 있는 기질세포를 대상으로 유전자를 분리하여 643종의 유전자원을 확보하고 염기서열을 결정하여 data base를 구축하였다. 또한 확보된 유전자를 이용하여 두 조직 혹은 두세포간의 유전자 발현의 차이를 조사하는 Differential EST Screening (DES) 방법을 독자적으로 개발하고 이 방법을 이용하여 두경부암 및 대장암에서 발현이 변동된 유전자를 탐색하였다. 그 결과, 각종 유전자 탐침을 확보하게 됨으로써 이를 필요로 하는 연구팀에게 분양을 해 줄 수 있게 되었으며 유전자 판넬을 저렴한 가격으로 공급해 줄 수 있다. 또한 본 연구팀이 확보한 유전자 분리, 분석 기술과 신기능 유전자 분리기술, 유전자기능 분석기술등을 타기관에 제공할 수 있다. 유전자 database를 타기관도 자유롭게 접속할 수 있게 함으로써 유전자 정보를 제공할 수 있다

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한국생산기술연구원
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2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

작물의 기관발생 및 화기형성 조절 유전자의 개발

배추와 고추로부터 유전자 개발 및 조작기술과 형질전환 기술 등을 이용하여 개화시기의 조절, 웅성불임의 유도 및 환경 내성을 간직한 신기능 작물을 개발하기 위하여 배추의 약, 화사 및 암술로부터 부터 poly(A)+ RNA를 분리하고 이를 이용하여 cDNA library를 제조하였다.약의 cDNA library로부터 약 특이 cDNA clone을 분리하기 위하여 차별혼성화 반응을 수행함으로써 43개의 약 특이 cDNA clone을 확보하였으며, 이들중에서 5개의 clone이 기존의 유전자와 유사성을 보였다. 배추 약 특이성 clone 중에서 유채의 화분 특이 clone인 BAN215에 해당하는 유전자를 genomic library로부터 분리해 내고 이의 promoter에 GUS 유전자를 부착하여 담배에 도입시켜 발현을 조사한 결과 GUS 활성이 화분에서만 특이하게 발현되는 것을 관찰하였다.배추의 화사 cDNA library를 탐색하여 화사 특이성 clone인 C38을 분리하였다. 또한 암술 cDNA library에서 분리된 111개의 cDNA clone에 대하여 부분적인 염기서열을 결정하고 database를 탐색한 결과 27개의 clone이 기존의 유전자와 동질성을 보여주었는데 이들에는 가뭄에 의하여 유도되는 유전자와 자가불화합성 관련 thioredoxin 유사 유전자가 포함되었다.또한 고추에서 유용유전자를 분리하기 위하여 genomic library를 제조하였다

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한국생산기술연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

형질전환 동.식물 이용기술 개발

형질전환 동식물 이용기술 개발을 목표로 다음과 같은 연구결과를 얻었다.형질전환 동물 분야 유용물질을 유즙중에 생산하는 형질전환동물 (젖소, 산양) 개발을 목표로 사람락토페린 생산 형질전환 생쥐의 유전성 및 유선조직 발현특이성이 관찰되었으며 사람 성장호르몬을 다량 (5500 ±620㎍/ml) 생산하는 형질전환 생쥐도 생산되었다. 또한 외래유전자가 수정란에 이식된 정상적인 송아지도 7마리 생산되었다. 형질전환 산양을 개발할 목적으로 사람 G-CSF, GM-CSF, goat β-casein 유전자가 클로닝되어 유선조직 특이 발현 vector 2종을 제작하였으며, 산양 수정란 및 정액 채취, 수정란 배양조건이 확립되었다. 그리고 염소 β-lactoglobulin의 5'조절부위와 α 1-antitrypsin, erythropoietin 유전자를 이용하여 각각의 발현벡터를 만들고 유선세포 및 형질전환 생쥐에서의 발현을 관찰하였다. 한편 국제공동연구로 신호전달효소인 PLC와 항산화물질인 TPx 의 유전자도 클로닝하였다. 이상의 결과를 통하여 형질전환 동물 (젖소, 산양) 개발에 필요한 기반기술이 확립되었다고 판단된다.

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한국생산기술연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

신호전달계 효소 및 항산화물질 관련 형질전환 동물 개발

Phospholipase C (PLC)와 thioredoxin peroxidase (TPx)에 대한 분자 유전학적 연구를 수행하고 이를 바탕으로 관련 인체 질병에 대한 형질전환 모델 동물을 제작하고자 제 1차년도에서 다음과 같은 기반 연구결과를 얻었다. 1. PLC의 분자유전학적 연구Balb/c genomic library에서 PLCβ3 유전자의 exon 5를 함유하는 DNA 절편과 PLCβ4 유전자의 exon 6을 포함하는 DNA 절편을 각각 cloning 하였고, exon/intron의 구조와 위치, 제한효소지도 등을 작성하므로써 gene targeting에 사용될 vector 제작에 필요한 분자유전학적 기반을 마련하였다. 2. TPx의 분자유전학적 연구생쥐의 뇌 cDNA library로부터 TPx 유전자를 분리하여 단백질의 구조를 확인하였고, 생쥐 1292종의 genomic DNA library로부터 3종의 TPx genomic DNA clone을 분리하여 exon/intron의 구조, 제한효소지도 등을 연구한 결과 생쥐 genome에는 적어도 2가지 이상의 밀접히 연관된 TPx 유전자가 존재함이 파악되었다. 이 중 한가지는 적어도 6개의 exon과 5개의 intron으로 형성되는 구조를 가지고 있었으나, 다른 한가지는 단일 exon과 5개의 intron으로 형성되는 구조를 가지고 있었으나. 다른 한가지는 단일 exon으로 구성되어 있다. 두 TPx 유전자 모두 198개의 아미노산으로 구성되는 단백질을 암호화할 수 있었으며, 그 아미노산 서열의 유사성은 약 96%였다. 3. 유전자 발현조절부위의 분리생쥐 129 SVJ의 genomic library로부터 metallotheinein, albumin 등 조직 특이적 발현 유전자의 promoter와 Tpx 유전자의 promoter 등을 분리하였고, 이에 대한 제한효소 지도를 작성하였다. 4. Gene targeting을 위한 기반기술배아간세포 (embryonic stem cell : ES cell)에서의 homelogous recombination을 통한 gene targeting 기법에 의하여 형질전환 동물을 제작하고자, 그 기초기술로써 feeder cell의 제조, ES 세포주의 계대 및 유지기술, ES 세포주를 이용한 chimera 생산방법 등을 해외훈련을 통하여 습득하고 본 연구실에서 확립하였다.

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한국생산기술연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

인간 단백질 탈인산화효소 k 유전자, 그의 염기서열 및 그의 염기서열 및 그의 아미노산 서열

. 인간 정상의 각질세포(keratinocyte)로 부터 새로운 단백질 탈인산화효소 k(protein phospahtase k) 유전자, 그 염기서열, 아미노산서열로 단백질 인산화의 가역적 장용을 통하여 각종 암을 포함한 세포내 신호전달이상 질병 치료및 예방

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한국생명공학연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

인간 단백질 변이인산화효소 유전자(HPK 38), 그의 염기서열, 효소 단백질 및 그의 아미노산 서열

.인간의 정상피부의 각질세포 케라티노사이트로 부터 클로닝한 새로운 단백질 변이 인산화효소 유전자, 염기서열, 해독 효소단백질로 세포분열, 분화, 발생등을 조절하는 효소로, 신호전달이상 질병 예방, 치료

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한국생명공학연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

한세눌라 폴리모르파 DL-1 유래의 다중병렬도입형 자기복제서열 및 이를 포함하는 발현 벡터

본 발명은 한세눌라 폴리모르파(Hansenula polymorpha)의 염색체에 외래 유전자를 다중으로 도입하는 다중병렬도입형 발현벡터에 관한 것으로, 구체적으로는 3-말단에 서열 5-GGGTGGCG-3의 반복단위를 포함하는 한세눌라 폴리모르파 DL-1(ATCC 26012)의 다중병렬도입형 자기복제서열, 프로모터, 상기 프로모터의 하류에 위치하는 지배적 선별 유전자 및 영양요구성 선별 유전자를 포함하는 선별 카세트를 포함하는, 한세눌라 폴리모르파의 다중병렬도입형 발현 벡터에 관한 것이다.

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한국생명공학연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

재조합 히루딘 유전자와 그의 발현

.항혈전제 개발 .재조합 히루딘유전자와 발현방법 .효모용 히루딘 발현벡터 .사카로마이세스 세레비시에 신균주, 배지

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한국생명공학연구원
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2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

효모로부터 재조합 히루딘을 생산하는 방법

.효모로 부터 재조합 히루딘 생산방법 . 재조함 히루딘유전자 발현, 효모조전 최적화 .배지, 유가배양, 균주 사카로마이세스 세레비시에2805

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한국생명공학연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

한세눌라 몰리모르파용 다중병렬도입형 발현벡터

본 발명은 한세눌라 폴리모르파(Hansenula polymorpha)의 염색체에 외래 유전자를 다중으로 도입하는 다중병렬도입형 발현벡터에 관한 것으로, 구체적으로는 3-말단에 서열 5-GGGTGGCG-3의 반복단위를 포함하는 한세눌라 폴리모르파 DL-1(ATCC 26012)의 다중병렬도입형 자기복제서열, 프로모터, 상기 프로모터의 하류에 위치하는 지배적 선별 유전자 및 영양요구성 선별 유전자를 포함하는 선별 카세트를 포함하는, 한세눌라 폴리모르파의 다중병렬도입형 발현 벡터에 관한 것이다.

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한국생명공학연구원
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2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

한세룰라 폴리모르파의 GAPDH 유전자 및 이의 프로모터

본 발명은 한세눌라 폴리모르파(Hansenula polymorpha)의 글리세르알데히드-3-인산 탈수소효소(GAPDH) 유전자, GAPDH 프로모터 및 이 프로모터를 함유하는 발현 벡터에 관한 것으로, 본 발명에 따른 GAPDH 프로모터는 강력한 구성적 발현 프로모터로서 탄소원에 따른 별도의 발현 유도가 필요하지 않으므로 한세눌라 폴리모르파에서 외래 단백질을 발현시키는데 매우 유용한다.

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한국생명공학연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

한세룰라 폴리모르파 유래의 다중병렬도입형 자기복제서열

본 발명은 한세눌라 폴리모르파(Hansenula polymorpha) DL-1(ATCC 26012) 유래의 다중병렬도입형(multiple tandem integrating) 자기복제서열(autonomously replicating sequence, ARS) 및 이를 포함하는 발현벡터에 관한 것이다.

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한국생명공학연구원
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2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

표면발현 벡터 및 이를 이용한 단백질의 미생물 표면 발현 방법

.그람음성 세균인 슈도모나스 시링게에서 유래한 세포외막 단백질인 빙핵활성단백질을 이용, 외래 단백질을 세포 표면에서 안정적으로 발현시키는 새로운 벡터, 표면 발현된 외래단백질 사용용도, 벡터, 형질전환체,펩티드라이브라리 용도.

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한국생명공학연구원
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2000-04-07
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표면발현 벡터 및 이를 이용한 단백질의 미생물 표면 발현 방법

.그람음성 세균인 슈도모나스 시링게에서 유래한 세포외막 단백질인 빙핵활성단백질을 이용, 외래 단백질을 세포 표면에서 안정적으로 발현시키는 새로운 벡터, 표면 발현된 외래단백질 사용용도, 벡터, 형질전환체,펩티드라이브라리 용도

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한국생명공학연구원
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2000-04-07
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