인간 아데닐레이트 키나제 2B 단백질 및 이의 제조방법
.인간 태아 간조직으로 부터 유도된 아데닐레이트 키나제 2B단백질에 관한것으로, 인간 태아의 간조직으로 부터 인간 AK2B유전자를 유도하여 이의 염기서열 및 아미노산서열을 규정하고, 플라스미드로 형질전환된 대장균을 배양하여, 인간 AK23단백질을 대량 발현기술에 관한 연구.
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- 2000-04-07
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3 / 24 페이지인간 N-아세틸글루코사민 전이효소III(N-acetylolucosaminyl- transferase III)의 조절유전자 및 염기서열
암세포조직에서 특이적으로 발현되는 인간 N-아세틸글루코사민 전이효소의 조절유전자 및 염기서열, 플라스미드, 형질전환체에 관한 연구.
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- 2000-04-07
변형된 프로모터와 leu2-d 유전자를 포함하는 신규 효모 발현 벡터
.프로모터에 연결된 단백질 유전자의 번역개시 코돈으로 부터 아데닌으로 치환된 변형 프로모터와 효모의 루이신 합성에 관여한 ㄴLEU2유전자의 프로모터로 효모로 부터 발현율을 높일수 있는 신규 발현 벡터에 관한 연구.
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- 2000-04-07
효모를 이용한 사람의 인터루킨-6의 제조방법
.인체에 존재하는 사이토카인의 일종으로서 중요한 작용을 하는 인터루킨-6의 유전자를 포함하는 효모발현벡터 및 이를 이용하영 효모에서 인터루킨-6를 제조하는 방법, 플라스미드, 형질전환체에 관한 연구.
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- 2000-04-07
인간 리포코틴-1을 포함하는 신규한 유전자 운반체와 이를 이용한 인간리포코틴-1의 제조방법
인체 리포코틴-1 플라스미드, 인간 리포코틴- 제조방법 .trc 프로모터 플라스미드, 대장균균주에 관한 연구.
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- 2000-04-07
결정성의 Delta-Endotoxin 으로부터 만들어진 재조합 플라스미드 pbtn11-Producer(이는 갑충류에 독성을 나타낸다)를 포함하는 Pseudomonas Putida종족
본 연구의 목적은, 살충성 단백질의 합성에 대한 암호를 가지는 재조합 플라스미드 DNA를 생산하는데 있다. 또 다른 목적은, 결정성의 delta-endotoxin으로부터 만들어지는 Psedomonas putida strain-producer(이 물질은 Colorado potato beetles와 여타 갑충류에 대한 살균능력을 가지고 있다)를 개발하는데 있다.CryIIIA delta-endotoxin의 합성에 대한 암호코드를 가지는 plasmid pBTN11이 생산되었다. pBTN11을 대장균 계열의 S17-1에 이전시킴으로써 P.putida종족의 IPM-36이 얻어졌으며, 또한 pBTN11을 P.putida계열의 BS1356에 연속적으로 이전시키는 과정을 통해서도 IPM-36을 얻을 수 있었다. 획득된 종족은 절대적인 혐기성 생물이며, 28도에서 30도 사이의 범위의 온도와 6.8 - 7.7의 pH에서 최적의 생장을 나타낸다. 이 종족은 42도에서는 성장하지 않는다.
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- 2000-04-24
살충성 단백질 유전자를 포함하는 재조합 플라스미드 DNA (ptv241): Bacillus Thuringiensis 아종의 생산과 Colorado Potato Beetles 에 저항성을 나타내는 Thur
트란스포존(이는 Bacillus 종의 세포내로 함입될 수 있다)내에서 cryIIIA 유전자를 운반할 수 있는 재조합 DNA 플라스미드인 pTV241이 생산되었다. 이 플라스미드는 다음과 같은 구성 성분을 갖는다. (1) vector plasmid(12.4 b.p.pTV24)의 완전한 서열 (2) Bacillus Thuringiensis의 아종인 tenebrionis가 갖는 BgIII DNA 조각내의 BamHI의 완전한 서열 (3) Bacillus Thuringiensis의 아종인 tenebrionis가 갖는 delta-endotoxin의 모든 유전자 (4) tetracyclin 내성 유전자 (5) chloramphenicol 내성 유전자 (6) Tn917 트란스포존 이동에 필요한 유전자와 구성요소 (7) 플라스미드 pE194의 내열성 기구(temperature-resistant apparatus) 에 관련된 유전자 구성요소 (8) 엔도뉴클라제(EcoRI)에 의한 제한 지점(0, 6.9 and 7.4 b.p.) (9) 엔도뉴클라제(PstI)에 의한 제한 지점(8.4 and 13.7 b.p.) (10) 엔도뉴클라제(BamHI)에 의한 제한 지점(9.1 b.p.)재조합 DNA 플라스미드인 pTV241은 높은 살충성을 가지며 식물의 성장에 아무런 간섭을 끼치지 않는다.
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- 2000-04-24
융합 단백질인 DTIL 2를 생산할 수 있는 재조합 플라스미드 DNA DTI 23: 재조합 플라스미드를 함유하는 대장균 계열의 생산방법
4.7 b.p.의 크기를 갖는 재조합 플라스미드 DNA pDTI 23은 사람의 DTIL 2 융합 단백질의 합성을 결정한다. 이 플라스미드 DNA의 분자량은 3.1 mDa이다. 또한 이는 pUC 18플라스미드의 부분인 Sma1-Sma4 Gl와 pSF39플라스미드의 부분인 Eco24.1-SalG1을 포함하고 있다. 또한 gene marker (유전자 탐지자)와 암피실린 내성을 결정짓는 유전자를 포함한다.재조합 플라스미드 DNApDTI 23은 여러 단계를 거쳐 합성할 수 있다. 그 과정을 두 단계로요약하면 다음과 같다. 첫째는, 제한효소인 EcoRI과 BamHI를 이용하여 pDT555를 완전히 가수분해하는 과정이다. 그리고 둘째는, 디프테리아 톡신 유전자에 해당하는 2.3 b.p.의 DNA조각을 분리하는 과정이다.
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- 2000-04-24
여러 설치류 종족에 있어서의 t-complex DNA-Elements의 다형성(多形成)
t-complex는 생쥐의 17번 염색체의 3번째 부분의 변형된 형태이다. 이 연구의 목적은 t-specific DNA elements(D17Leh48, D17Leh66, D17Leh119, D17Leh122)의 다양성과 위치를 파악하는데 있다.우리는 야생생쥐(Mus 종족에 속하는)와 많은 종류의 설치류 족속의 DNA에 대한 분자수준에서의 분석을 수행했다. Multilocus DNA fingerprinting, DNA taxoprinting, 그리고 RAPD PCR등의 방법이 설치류에서의 유전적 다양성을 연구하는데 사용되었다. 이 t-complex의 다형성으로 인하여 설치류의 개인차가 나타난다는 것을 알게 되었다.설치류 종족에 있어서의 유전적 다양성에 대한 연구
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- 2000-04-24
처녀생식을 하는 도마뱀 종족의 클론 다양성에 대한 연구
우리는 게놈의 다양성을 연구하는 새로운 접근법을 개발했는데, 그것은 DNA taxonoprinting 이라는 방법이다. 이 방법은 생물 분류학과 계통 발생학에 이용될 수 있다. 영장류, 도마뱀류, 고슴도치류, 쥐, 누에등과 같은 다양한 종족의 분화에 대한 연구에 이 방법이 이용된다. DNA taxonoprinting을 통해서 26종의 도마뱀 (처녀생식을 하는 종족을 포함한) 을 분류하였는데, 이를 통해서, 형태학적이고 다른 요인에 따라 계통분류를 할 수 있었다. 처녀 생식을 하는 도마뱀 종족의 클론 다양성의 연구에는 multilocus DNA fingerprinting과 RAPD PCR 방법이 사용된다. 그 결과 이들 종족에 있어서 개인적인 차이의 규명을 분명하게 할 수 있었다. 그러나 몇가지의 게놈의 차이는 돌연변이에 의한다.생물의 다양성, 종족 분화, 그리고 돌연변이적 영향에 대한 연구
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- 2000-04-24
기생충의 게놈 다양성과 그에 따르는 숙주-기생충 상호작용에 대한 연구
RAPD PCR 방법은, 몇몇 종족과 ginera Trichinella, Fasciola, 그리고 Echinococcs에 속하는 기생충 계열에서의 DNA 다형성을 탐지하는데 사용된다. 기생충의 유전적 다양성, 인구 유전학, 그리고 진화의 연구에 필요한 RAPD 탐지자들 (이는 종족에 따라, 그리고 계통에 따라 특수성을 나타낸다.) 이 생산되었다. Trichinella spiralis와 T.pseudospiralis의 RAPD 산물이 pMOSBlue-T vector에서 클론화 되었다. 재조합 클론으로부터의 DNA가 분리되고 특징이 규명되었다. 클론화된 DNA의 부분적인 sequencing을 통해서 기생충 종족의 상동관계( 몇몇 알려진 바이러스, 포유류, 그리고 기생충의 sequence에 대한)를 알 수 있었다. Blot-hybridization 실험을 통해서, 클론화된 RAPD 탐지자가 기생충의 동정에 사용된다는 것이 밝혀지게 되었다.클론화된 DNA는 기생충의 동정을 위한 진단 탐침으로 사용된다.
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- 2000-04-24
러시아에 거주하는 동유럽 종족과 시베리언 종족에 있어서의 DNA다양성에 대한 연구
대부분의 러시아 주민들은 인류학적으로 상당히 흥미있는 지역에 거주한다. 왜냐하면, 이 지역은 코카소이드 종족과 몽골리안 종족이 혼재하는 지역이기 때문이다. 따라서 유러아시안 계열의 인종발생과정에서의 양 종족의 상호작용과 관계를 분석해 볼 수있다.종족들이 이계교배를 하게 될 때, 언제나 단순한 혼합만이 일어나는 것은 아니다. 때에 따라서는 유전자 순열 조합론에 의해서 특수하고 새로운 계열의 조합이 발생할 수 있다. 따라서 양 종족의 기원과 인종발생에 대한 의문점을 풀기 위해서는 DNA적인 특질을 실험해야 한다.본 프로젝트의 목적은 러시아에 존재하는 다양한 족속들의 DNA 분석에 의해서 그 다양성을 이해하는 것이다. 이를 위해서 다양한 종류의 DNA polymorphisms의 조합을 사용할 것이다.러시아에는 코카소이드족과 몽골로이드족의 양인자가 다양한 정도로 혼합된 종족이 많이 존재한다. 이러한 종족들의 분석을 위해서 광범위한 범위의 DNA marker가 이용될 것이다. 인접한 지역에 사는 종족뿐 아니라, 지역적으로 떨어진 곳에 사는 종족들의 비교를 통해서, 연구 대상이 되는 종족의 기원과 발생에 코카소이드 족과 몽골로이드족의 인자가 어떤 역할을 했는지를 알 수 있을 것이다.
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- 2000-04-24
Yersinia Pestis의 f1 오페론 에 의해 암호화되는 샤페론의 이용 - 이종 단백질(이는 의약품과 수의약품의 제조에 쓰인다)을 분비하는 대장균 계열을 생산하는데
샤페론과 이를 유도하는 유전자의 발견은 현대의 생명공학에 새로운 장을 열었다. 샤페론은 백신과 약물을 이동시키고, 조직과 근육등의 손상 치유를 가속화한다. 샤페론은 독특한 면역조절능력을 보유하기 때문에, 암이나 감염성 질환 그리고 염증등을 치료할 수 있는 약품 제조에 이용된다. 또 다른 이용 가능성이 있다. 즉, 샤페론을 유도하는 유전자를 이용하여 분비성 vector를 생산하는 것이다. 그리하여, 이 vector로 하여금 의약품과 수의약품에 쓰이는 단백질을 분비하게 하는 것이다. 본 프로젝트는 이러한 샤페론의 기능에 관한 연구를 한다. 즉, Yersina Pestis의 f1 오페론을 이용하여 대장균을 생산하고 이 대장균으로 하여금 유용한 단백질을 분비하게 하고자 하는 것이다. 이 단백질은 다양한 의약품과 수의약품의 제조에 쓰인다.활성화된 천연산의 사이토카인과 성장 인자, 그리고 기타 단백질은 의학과 수의학에 이용될 것이다.
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- 2000-04-24
살충제 단백질 유전자를 포함하는 재조합 플라스미드 DNA ptv 241: 콜로라도 감자 벌레에 효과를 발휘하는 Bacillius Thuringinesis Subsp. Thuringinesis IPM
Bacillus Spp의 세포내로 이동할 수 있는 transposone내에 cryIIIA-gene을 포함하는 재조합 DNA 플라스미드 ptv 241를 생산하는데 성공하였다.
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- 2000-04-24
낮고 높은 LET 복사에 의한 유전자 위치와 유전자 구조의 변환에 영향을 주는 DNA 손상의 분자 지도와 순서.
복사의 정도에 따른 변환된 유전자의 유전 메커니즘과 분자의 규칙성의 규명은 복사의 차단과 우주 안전을 보장하는데 필요한 중요한 요건들 중의 하나이다. 이러한 문제는 방대한 과제로써, 감마선, 중성자, 양성자, 초파리 유전자를 이용한 정변환의 분석과 같은 복잡한 분자-세포-유전자 분석이 현재 진행중이다. 감마선과 중성자에 대한 첫번째 연구결과는 매우 흥미 있고 중요한 것이라는 것을 보여준다. 또한 다음과 같은 복사를 받은 진핵 생물의 세포에서의 유전자 구조의 변형과정의 새로운 분자적인 특성을 보인다. (i) 치환과 위치 변경 된 끊긴 지점은 하나의 유전자 내에서 규칙적으로 존재한다. (ii) 끊긴 점들은 거대 인트론의 특정하고도 규칙적으로 짧은 순서들 내에서 모여있다. (iii) 끊긴 부분의 세 번째의 대부분은 7에서 38 kb 크기의 유전자 분자의 결여에 의해서 측면에 위치한다. 이러한 새로운 발견들은 초파리의 특별한 유전자의 위치 배열의 장점을 통한 우주에서의 유전자 보호에 대한 과학적인 기초에 중요한 기여를 할 것이다.복사한계, 유전자 보호, 우주에서의 유전자의 손상 위험도에 대한 과학적인 기초를 구축.
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- 2000-04-24
체르노빌 원전 누출사고 이후 방사능 낙진으로 오염된 러시아의 일부지역 출신 아동들의 갑상선 암에서 나타난 게놈, protooncogene 및 antioncogene의 변형에
체르노빌 누출사고 이후 벨로러시안 지역에 거주하는 아동들에게서 갑상선암의 발병이 증가했음이 보도된데 이어 방사능에 노출된 러시아 인들 가운데서는 갑상선의 종양 발병 역시 증가했음이 밝혀졌다.갑상선암과 종양발생 초기단계와 관련된 유전적 성향에 관한 DNA 진단을 위한 잠재적인 마커의 개발.
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- 2000-04-24
면역조절을 통한 염증 치료법 개발
섬오갈피(Acanthopanax koreanum)의 근피로부터 추출한(-)-피마라-9(11), 15-디엔-19-오산(아칸토산(acanthoic acid) 및 이를 이용하여 인체의 면역체계를 조절하는 중요한 인자인 인터루킨-1(interleukin-1, IL-1)과 종양괴사인자-알파(tumor necrosis factor-α, TNF-α)의 생산을 조절함으로써, IL-1과 TNF-α의 생산량과 관련이 있는 콜라겐 생산, 반응성 산소생산 및 섬유아세포 증식을 억제하여 실험동물의 규폐증, 간경변 등을 효과적으로 억제하는 방법면역기능조절을 통한 효과적인 항염증치료. 임상실험 필요
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- 2000-04-29
조직특이적 유전자 발현양상 분석 기술
생체내에 있는 유전자가 어떠한 조직과 세포에서 언제, 얼마만큼의 양으로 발현되고 있는지를 유전자의 전사물질인 mRNA와 최종 산물인 단백질의 분포양상을 통해 확인하는 기술. 본 기술은 국내의 의·약·생물학 관련 실험실이나, 연구실에서 행해지는 유전자 관련 연구에 거의 모두 활용할 수 있으며 이로 인한 연구의 질적 향상으로 국가적 경쟁력의 제고를 가져올 수 있을 것이다.우리가 보유한 기술은 조직내의 특정세포 수준에서 발현양상을 확인할 수 있는 기술이기 때문에 유전자의 기능을 조직별로 분석하는데 있어서는 매우 중요한 핵심적인 기술이다단기간에 습득하기 힘든 조직학적 노하우가 필요하다.
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- 2000-04-29
유전자센서
유전자진단법으로는 옛부터 Southern Plot법이 이용되어 왔는데, 이 방법에는 X선조사설비가 필요하며, 검출에 수십시간이나 걸렸다. 이 기술에서는 특정한 유전자와 반응하는 하나의 유전자를 전극상에 고정하여, 검체시료에서 특정유전자만을 전기화학적으로 보충하여, 삽입제라 불리는 색소를 작용시켜서 산화전류를 측정하므로써, 특정유전자의 농도를 특정한다. 전극을 여러 종류의 용액에 담그는 간단한 조작으로, 측정시간도 약 1시간정도까지 단축할 수 있다. 발증전의 잠복기간에서의 질병진단과 juice 등의 액상식품에 포함된 세균검사에도 적용할 수가 있다.검출시간을 단축한 하나의 유전자센서의 기본적 원리
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- 2000-04-29
메타놀자화 효모를 이용한 재조합 단백질 최적발현 시스템 개발
효율적인 재조합 hEGF 생산 system 개발을 위하여 몇 가지 균주중에서 메타놀에 대한 저항성이 높은 외래 유전자 발현 효율이 높은 H. polymorpha DL -1 균주를 선별하여 동 균주를 이용한 발현 system 개량을 위해서 DL-1 균주로부터 multicopy integration을 유도하는 신규 HARS 유전자를 cloning 하고 형질전환효율 및 외래유전자 도입효율이 상대적으로 높은 HARS36을 선별하였다. 외래 단백질의 발현 system 의 개량을 위해서 H.polymorpha DL-1 유래의 몇 가지 강력한 발현 promoter를 확보하여 특성분석이 진행되었으며 다목적 재조합 단백질 생산을 위한 vector 들을 다량 확보하였다. 또 하나 효모를 이용한 외래단백질의 생산량잉 한계가 주로 분비능력에 기인하는 경우가 많기 때문에 이러한 분비능이 약 2-10배까지 향상된 균주를 확보하였다.고효율 재조합 hEGF 생산 균주 확보를 위해서 다양한 방법을 이용하여 hEGF 발현 카세트의 도입을 시도한 바 H.polymorpha 의 uracil 영양요구성을 slow complement 할 것으로 예상되는 Sc-URA3 을 이용한 형질전환에서 비교적 용이하게 고효율 재조합 hEGF 생산균주를 확보할 수 있었고 이 균주의 재조합 hEGF 생산성은 기존의 대조구에 비해 약 15배 이상이 증가되어 약 0.5 g/L 의 재조합 hEGF 를 최적화되지 않은 flask배양에서 얻을 수 있었다. 이러한 생산성은 향후 발효조를 이용한 배양최적화 연구를 통하면 더욱 증가도리 수 있을 것으로 사료된다.
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- 한국생산기술연구원
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- 2000-09-02