일반기술

유전자 칩 분석으로 동정한 혈관 생성 유전자

Thomas Quertermous와 Jay Wohlgemuth 박사는 혈관 생성과 다혈관 발생에 관련된 유전자의 cDNA 라이브러리를 생성하였다, 이 라이브러리는 미세 배열 분석에 이용될 수 있다, 사람 배꼽 정맥 내피 세포(HUVEC)는 콜라겐과 라미닌을 포함하는 젤상에서 조직 배양된다, 다혈관 내피 생장 인자(VEGF)로 촉진시켰을 때 HUVEC는 신장, 이주, 부착 그리고 in vivo에서 모세관 망상과 유사한 관 네트워크를 초래하는 류멘 형성을 겪는다, 관 혈성 과정중인 세포로부터 RNA를 분리해 cDNA를 합성한다, 휴지상 그리고 융합성의 HUVEC로부터 분리한 cDNA는 공제/억제 PCR 클로닝에 의한 cDNA의 공제(subtraction) 라이브러리 생성에 이용된다, 이 과정은 내피 관 형성에서 촉진 그리고 억제 조절되는 유전자 염기 서열의 라이브러리를 생성한다, 위에 명시한 라이브러리에서 유래된 2200개 이상 cDNA와 수많은 positive, negative 대조구가 PCR로 증폭되고 미세 배열상에 점적된다, RNA 표본으로 추적한 배열 유전자 분석은 실제로 촉진 조절되는 유전자의 동정과 조절양의 상대적 정량을 제시한다, cDNA 분석은 스탠포드에서 이루어지지 않으나 실험 목표는 내피 세포 특이적인 조절형 유전자의 결정과 어느 유전자가 여러 생리학적 그리고 병리 생리학적 조건에서 촉진 조절되는가를 알아내는데 있다, 유전 정보의 할당과 더 상세한 기능성 게놈 연구는 구상된 단백질 아미노산 서열과의 hybridization 결과 상관성과 실리코(silico) 발현 양상에서 이루어진다, 라이브러리 라이센스는 글리세롤 보존액상으로 부여되며 미세 배열은 포함되지 않는다자료 없음