일반기술

막 단백질의 발현을 위한 숙주/ 벡터(Vector)시스템

본 기술은 막 단백질의 발현을 위해 알맞는 톡특한 숙주/ 벡터 시스템으로 bacterium Rhodospirillum rubrum의 독특한 속성에 대한 이점을 가지므로 이용된다. R. rubrum 형태는 광범위한 내부 세포질로, 막 단백질의 합성에 반응하며 성장을 위해서는 불필요한 것이다. 이 시스템에서 숙주는 돌연변이 R. rubrum 종으로 스스로 주요 막 단백질들을 합성은 하지 않으므로 자연적인 ICM(intracytoplasmic membrane) 형태는 아니다. 그러나, 이 종은 외부 단백질의 발현을 포함한 단백질 합성에 대해 반응을 보이는 ICM을 만드는 능력을 가진다. 따라서, 이 종은 자신의 막 단백질들이 없는 경우에도 ICM을 만들 수 있기 때문에 외막내로 외부 막 단백질과 발현된 막 단백질을 혼합시킬 수 있다. 게다가 이 시스템에서 유전자 발현은 산소에 의해 조절되면 이 발현은 간단히 확실한 조절을 받으므로 가능성있는 유독한 유도물질이나 값비싼 화학 유도물질이 필요 없다.- 발현된 막 단백질들은 ICM(intracytoplasmic membrane)내로 섞을 수 있으므로 최근 상업적으로 이용가능한 발현 시스템에서 과 발현된 막 단백질을 기술적인 문제들 즉, 숙주의 치사율등을 개선할 수 있다.환원된 산소의 농도에 의해 증가된 프로모터(promoter)로 구성된 발현 벡터(expression vector)는 단순하며 적은 비용으로 연구실에서 이용하여 생성할 수 있다.- 숙주는 사람에 무독성이며 단순한 영양물에서도 잘 자라는 R.rubrum로 실험하기가 쉽고 간단한 잘 자란다. ICM(intracytoplasmic membrane)는 다른 세포 물질로부터 쉽게 분리되며 빠르게 막 단백질이 정제된다. 이 시스템은 제노믹 염기 서열 분석에서 알려지지 않은 유전자들이 동정되므로 가상적인 막 단백질들을 암호화하여 분석을 촉진시킬수 있다.- 감염 가능한 백신없이도 큰 용량으로 생성 가능하며 효과적이다- 자연적인 외부 막 단백질의 발현은 이 시스템에서 확인되었다.