일반기술

DNA 삽입 복합체를 이용한 다중발색단 형광탐침

본 기술에서는 광범위한 분석에 응용할 수 있는 탐침 (Probes) 을 제작할 수 있는 새로운 방법을 개발하였다. 이 기술은 이중가닥 DNA에 대해 높은 친화력을 갖는 양이온 형광 삽입색소를 이용하였다. 형광염색물질 중 하나인 ethidium 동형이합체 양이온 (ethidium homodimer cation)은 네 개 혹은 다섯 개의 염기에 대해 한 개 꼴로 이중가닥 DNA와 복합체를 형성한다 (Proc. Nat`l. Acad. Sci. 87, 3851-3855, 1990). 이 방법은 여러 개의 형광색소들이 하나의 이중가닥 DNA에 결합할 수 있게 하기 때문에 형광신호 (fluorescent signal)의 강도를 높일 수 있다.- 본 복합체는 안정도가 매우 높음: 일반적인 아가로우스 젤 전기영동 (agarose gel electrophoresis) 상황에서 견딜 수 있음.- 전기영동 분리 후, 25 pg 이하의 DNA 밴드 (band)도 쉽게 검출할 수 있음.- DNA-색소 탐침 (DNA-dye probe)은 바이오틴 (Biotin)이나 관심있는 항체로의 결합에 의해 제작될 수 있음.l이중가닥 DNA와, 특이적 혼성화 (Hybridization)를 위한 단일 DNA 말단으로 구성된 DNA-색소 탐침을 제작할 수 있음.