일반기술

핵산 표시법

Class II 제한효소에 의해 발생되는 유전자절편을 선택적으로 증폭하기 위한 제한부위 (restriction site) 표시법은 Class II 효소 절단에 의해 생성된 절편의 말단에 근접한 절편 표시 유전자서열에 대하여 상보적인 접합기 (adaptor) 표시 유전자서열을 함유하고 있는, 절편 말단에 특이적인 접합기를 포함한다. 조합의 표시법은 밝혀지지 않은 유전자서열로 이루어진 제한 절편의 증폭을 용이하게 한다.- Restriction site: 특수 제한효소에 의하여 절단되는 DNA의 특정한 염기서열 부위- Type II restriction enzyme: 인식부위와 절단부위가 모두 특이성이 있는 제한효소로 분자생물학 연구에 아주 유용하게 이용되고 있슴. 실험에 쓰이는 제한효소는 특별한 말이 없는 한 type II를 말함. 대부분의 type II 제한효소는 4개, 5개, 또는 6개의 염기서열을 인식하는데, 이에 따라 DNA 상에 인식부위가 나타나는 빈도가 달라지게 된다. 즉 6개의 염기서열을 인식한다면 이론상 4 6 =4096 base pair 마다 한번씩 출현하게 된다. 제한효소의 명명은 발견된 세균의 이름 및 항원형에 따라서 붙이게 된다. 즉 Hin f II는 H aemophilus in fluenza type f 에서 분리된 것이다. 제한효소가 인식할 수 있는 부위는 palindrome, 즉 앞으로 읽으나 뒤로 읽으나 염기서열이 같은 모양을 하고 있는 것이 특징이다. 잘린 후의 DNA 모양은 5`-overhang cohesive end, 3`-overhang cohesive end(sticky end) 또는 blunt end가 만들어질 수 있으므로 목적에 따라서 잘 선택해서 사용해야 한다.일반적인 PCR (Polymeriase chain reaction) 방법의 한계를 극복하기 위해, 40 kb 이상 길이의 밝혀지지 않은 서열의 유전물질로부터 얻어진 제한 절편의 증폭을 용이하게 할 수 있는 새로운 방법.