일반기술

CAAX 단백질 지질화공정효소인 AFC1와 RCE1

AFC1와 RCE1 두 유전자는 Ras처럼 CAAX 폴리펩타이드(polypeptides)의 후단백질지질화공정단계 (post-prenylation processing steps)를 조절하는 폴리펩타이드를 암호화한다. 두 유전자의 폴리펩타이드산물은 단백질지질화 과정을 통해 CAAX 폴리펩타이드로부터 AAX 3개의 펩타이드를 제거한다. 본 유전자들과 폴리펩타이드 산물들은 후단백질지질화 공정단계에 영향을 미치는 화합물 분석에 사용할 수 있다. 또한 본 개발은 Ras의 활성을 측정하는 열충격분석법 (heat shock assay)을 제공하고 있다. 지질화된 단백질은 카르복시 말단 근처에 콜레스테롤 중간체가 공유결합으로 결합되어 있다. 대부분의 지질화된 단백질의 완성 과정에는 마지막 3개의 아미노산의 제거가 필요하다. 효모(Saccharomyces cerevisiae)에 존재하는 RCE1과 AFC1 유전자는 이 과정에 관여하는 산물을 생산하는 것으로 밝혀졌다. Acf 단백질은 아연성 단백질분해효소 (zinc protease)로 효모의 a-factor 교배 페로몬의 공정에 관여한다. Rce1 단백질은 Ras 단백질과 a-factor 모두의 공정과정에 작용한다. AFC1 과 RCE1 유전자가 모두 제거되면, 프레닐화 단백질의 단백질 가수분해 과정은 진행되지 않는다. RCE1 유전자의 손실은 Ras 단백질의 위치결정과 신호전달과정에 문제를 유발하며, RAS2val19 대립유전자와 연관된 활성 표현형의 억제를 가져온다.지질화 단백질에는 Ras 종양유전자, 곰팡이 페로몬, G-protein의 γ subunit, 수포의 이동에 관여하는 다양한 종류의 small GTP-결합단백질 등이 포함된다.* CAAX motif: ‘C’는 cysteine 아미노산을, ‘A’는 aliphatic 아미노산을, ‘X’는 임의의 아미노산을 가리킨다. 본 motif는 type 1 protein prenyl기 전이효소 중 한 종류에 의해 직접 geranylgeranyltion 또는 farnesylation 될 수 있다.후단백질지질화 공정단계에 영향을 미치는 화합물 분석에 사용가능