일반기술

콜레스테롤 생합성 관련 델타 7-환원 효소의 저해제 검색 방법

스테롤 7-환원 효소의 활성도를 측정함으로써 생체내의 콜레스테롤 생합성 저해제의 검색을 단시간내에 효율적으로 행할 수 있는 방법을 제공하기 위함이다. 본 발명은 이 과제를 포유 동물의 간세포내에 포함되어 있는 스테롤 7-환원 효소와 기질로서 에르고스테롤(ergosterol : 5, 7, 22-ergostatrien-3β-ol)을 혐기성 조건으로 환원 반응을 행하고, 이 반응에 생성되는 특정시간 동안의 5, 22-에르고스타이엔-3베타-올(5,22-ergostadien-3β-ol)의 양을 스테롤 7-환원 효소의 활성도로 정의하여 약물의 첨가에 따른 스테롤 7-환원 효소의 활성도 변화량을 비교 평가하는 것으로 행하여지는 방법을 제공- 포유 동물의 간세포내에 포함되어 있는 스테롤 7-환원 효소와 기질로서 에르고스테롤 (ergosterol : 5, 7, 22 - ergostertrien-3β-ol)을 혐기성 조건으로 환원 반응시키고, 이 반응에 생성되는 특정 시간 동안의 5, 22-에르고스타디엔 -3β-올(5,22-ergostadien-3β-ol)의 양을 스테롤 7-환원 효소의 활성도로 정의하여 저해제 약물의 첨가에 따른 스테롤 7-환원 효소의 활성도 변화량을 비교 평가하는 것으로 행하여지는 콜레스테롤 생합성 저해제 검색 방법.- 스테롤 7-환원 효소는 포유 동물의 간세포를 균질화한 후 원심분리하여 얻은 마이크로솜의 형태로 존재하는 것임을 특징으로 하는 방법.- 스테롤 7- 환원 효소를 포함한 마이크로솜은 체중 150 내지 250g의 스프라귀 다우레이(Sprague Dawley)계 수컷을 채취원으로하여, 간세포를 채취하기전 식이의 형태를 0.1% 로바스타틴(lovastatin)또는 5% 콜레스티라민(cholestyramine)을 혼합한 식이(이를 CL식이라 한다.)를 3내지 10일간 행하여 스테롤 7-환원 효소의 활성도를 유발시켜 제조된 것임을 특징으로 하는 방법.