일반기술

웨스턴프로팅법에 의한 분석기술

본 웨스턴프로팅법은 마사야마 교수에 의해 개발 된 간이정성분석법이다. 당쇄(糖鎖) 함유화합물을 전개한 실리카겔 TLC플렛을 PVDF(polyvinylidene Fluoride)로 카바한다. 이에 프로팅액을 분무한후 120℃로 5분간 가열하고 TLC상의 전화합물을 막에 전사한다. PVDF막은 과요드산용액에서 처리하면 당쇄(糖鎖)는 산화되어 고리를 끊음으로서, 단백용액(예를들면, 소의 혈청알부민(BAS))을 첨가하면 막에 고정된다. 이 막에 별도제조한 당쇄(糖鎖)함유화합물의 모노크로날항체(Mab)를 첨가하여 시판된 페르오키시드표식 마우스(IgG Mab)및 기질을 순차반응시키면 발색하므로 검출할 수 있다.※ 당쇄(糖鎖)- 생체내에 존재하는 당류·배당체·당단백등의 당의 부분을 쇠사슬에 비유한 용어.당쇄(糖鎖)를 가진 화합물에서 Mab를 제작할 수 있는 것으로 본 웨스턴프로팅법으로, 전부 검출이 가능하다. 스테로이달 알카로이드 배당체는 감초의 글리시르리진, 자호(紫胡)의 사이코사포닌, 인삼 진세노시드(인삼 사포닌)류 등 Mab를 제작할 수 있는 것은 모두 검출에 성공하고 있다. 또한 기술의 용도로는 항 진세노시드 Mab을 이용하면 인삼배합 한방제제의 모든 성분안에 진세노시드류의 구조가 특이적으로 발색(發色)하므로 약용인삼을 배합한 처방인지 아닌지의 판별을 즉시 알 수 있다.