일반기술

해충제어용 활성미생물 탐색기술개발(II)

전국의 자연계로부터 지속적으로 BT 균주를 분리하여 총 3000여 균주를 확보하였으며 이들 중 2,000여 균주에 대하여 crystal morphology , 독소 단백질의 SDS - PAGE , bioassay , biochemical 특성조사 등을 완료하였고, DNA dot blot hybridization 및 PCR 을 통하여 가장 효과적으로 신규성이 있는 균주를 선별하는 방법을 확립하였다. 이런 방법으로 분리균주 BF190으로 부터 새로운 2개의 독소유전자를 발견하였으며 두종류 모두 cloning 하여 염기서열을 결정하였는데 둘다 기존의 다른 독소 유전자와 상동성을 가지지 않았다. 또한 분리주 BP465에서도 cryV-type 의 독소유전자를 발견하여 염기서열을 결정한 결과 새로운 독소유전자임이 밝혀졌다. 딱정벌레류에 독성을 보이는 Bt subsp. tenebrioruis(BTT)형태의 균주를 국내 최초로 분리하였으며 독소 단백질을 SDS -PAGE 로 분석한 결과 기존의 BTT 균주보다 더 많은 양의 독소단백질을 합성하는 균주를 발견할 수 있었다. 이러한 독소단백질 과다생산 균주는 기존의 BTT 균주보다 좀더 우수한 살충성을 보일 것으로 기대되며 기존의 BTT 제제와 경쟁력이 있을 것으로 기대된다. 한편 파밤나방에 대해서 가장 강한 활성을 보이는 cryIC유전자를 Bt subsp. entomocidus HD198 균주에서 cloning 한 후 이 유전자를 이용 재조합 plasmid 를 만들어서 BT 4D11 균주에서 발현시키는데 성공하였다. 이 재조합 균주는 파밤나방이 집중적으로 발생하는 시기에 작물의 보호에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 전망된다.