일반기술

신기능 혈전치료제의 개발. 신규 배란조절단백질의 연구. 신규항암제 합성효소의 개발. 신규 단일군항체 및 백신 개발

1. 신기능 혈전제 치료제의 개발을 위해 당해년도에는 C-terminal deletion mutagenesis를 수행하여 스트렙토키나제의 C-말단으로부터 각각 5, 26, 33, 37, 40, 46, 47, 70, 97개의 잔기가 결손된 돌연변이 스트렙토키나제를 얻었고 이들을 대장균에서 발현시킨 후 활성을 조사한 결과 C-말단으로부터 40-47 부위의 잔기들이 스트렙토키나제의 활성에 중요함을 규명하였다. 2. 펩티드 호르몬은 대개 생체막의 수용체와 결합하여 생리적 역할을 수행하는데 이러한 기작에서 펩티드 호르몬의 구조가 중요하리라 생각되고 LHRH (Lutenizing Hormone Releasing Hormone) 의 경우도 수용체와 상호작용 이전에 생체막과의 상호작용이 선행되고 이 막을 모사하는 환경에서의 구조가 중요하리라 생각되어 모델 생체막과의 결합 실험과 amphiphilic 환경에서의 구조 연구가 병행되었다. 3. 강력한 항암제 합성효소인 SP6 RNA 중합효소를 만들기 위해 C-말단 부위에 무작위로 돌연변이를 도입하여 새로운 RNA 중합효소를 만들었다. 여러 가지 만들어진 효소 돌연변이의 특징과 활성을 연구하였다. 또 대체 결합 물질로서 무작위로 합성된 DNA pool로부터 인간 TNF(Tumor Necrosis Factor)- 에 특이적으로 결합하는 핵산성 물질(aptamer)을 선별하였다. 선별된 aptamer는 gel mobility shift assay를 통해 결합능력을 확인한 후 플라스미드에 클로닝하였다. 4. 간염 바이러스의 표면항원중 preS2 부위에 특이성을 갖는 키메라 항체의 발현 벡터를 여러 동물세포주에서 강력한 것으로 알려진 인간 -actin promoter와 dhfr 유전자 증폭 system을 응용하여 제작, CHO cell에 그 항체 유전자를 도입 및 증폭하여 고생산성의 세포주를 선발하였다. 또한 바이러스 백신의 대량생산 공정의 개발을 위해 여러 가지 동물세포주와 몇 가지의 바이러스 종에 대하여 새로 개발된 배양 system의 성능을 시험하였다. 그리고 carbon paste를 이용하여 효소를 효과적으로 고정화할 수 있고 그 생성물질을 전기적으로 산화시켜 시료의 농도를 정확하고 빠르게 측정할 수 있는 biosensor를 개발하였다.