일반기술

DN4 항체의 생산, 정제 및 임상적 활용

DN4 단백은 인체 흉선 피질세포(thymic epithelial cell)에 표현되는 항원으로 DN4 항원의 성상을 밝히고, 항원의 유전자를 찾아 본 항원의 정상세포 및 각종 종양조직에서의 분포를 조사- DN4 단백질을 affinity column 을 이용하여 분리하고 peptide sequencing을 수행함. 그 결과를 토대로 degenerative probe를 만들어 PCR과 plaque hybridization을 이용하여 유전자 규명- DN4가 높게 발현 감마 인터페론을 처리한 THP-1 cell line을 대량 배양하여 이로부터 cDNA library를 확립하였고 COS-7에 transfection하여 Brain-Seed expression cloning을 수행- 인체 흉선 세포 자체를 면역원으로 사용함- random immunization 후 screening system 을 사용- 새로운 단 클론 항체를 개발하는 것은 대단히 힘들고 비용이 많이 든다. 특히 면역학연구에서 단클론 항체는 필수 불가결한 요소임- DN4 항체는 인체 흉성 피질 세포의 미지의 항원을 인지함. 이 항체는 인체 흉성 연구의 기본적 재료로 사용가능- 몇몇 임상적 질환을 진단하는 표시자로서 활용- 인체 흉선 연관 단백에 관한 항체 생산 방법을 확립