일반기술

명태 정원세포로 부터 DNA의 추출방법

추출방법으로 음이온 계면활성제와 고농도의 염화나트륨용액에 의한 방법을 사용하였다. 이 방법은 페놀을 사용하는 방법(미국특허 3,838,148)에 비해 공해문제가 없고 방법이 간단하고 시간이 적게 걸리므로 산업적인 생산에 유리하다. 명태로부터 분리된 고니는 진탕기에서 클로이드 상태로 분쇄된 뒤 2mm채를 통과시키고 생리염수에 녹여 원심분리하여 침전물을 모으는 세척 조작을 거쳐 세포핵을 분리한 후 여기에 음이온 계면활성제를 가하여 핵막과 핵단백질을 변성시킨 뒤 2N염화나트륨 용액으로 히스톤을 분리시켜 원심분리하여 변성된 단백질을 제거시키고 1/2부피의 이소프로판올을 가하여 생성된 섬유질을 분리하고 이것을 아세톤으로 씻고 건조시켜 백색의 데옥시리보핵산섬유를 얻는 방법이다. 본 발명에서는 추출방법을 최적화하기 위해서 추출용액의 부피와 사용되는 음이온 계면활성제의 농도에 따른 추출양의 변화를 조사하여 최소의 음이온 계면활성제의 농도에 따른 추출양의 변화를 조사하여 최소의 음이온 계면활성제와 유기용제를 사용하여 최대의 데옥시리보핵산을 추출해내는 방법을 개발하였다.