일반기술

유전공학적기법을 이용한 인체인슈린의 새로운 유전자 설계 및 이를 이용한 인체 인슈린의 제조방법

인슐린 유사체를 지령할 수 있는 합성 유전자를 이용하여 합성유전자를 미생물에 형질전환하고 발현하여 기존의 인슐린과 아미노산 배열이 다른 인슐린 유사체를 제공한다. 인체 인슐린의 B사슬의 카르복시 말단에 위치하는 아미노산이 쓰레오닌대신 메티오닌을 지령하는 암호로 대체시킨 인체 인슐린 B사슬의 유전자를 인체 인슐린 A사슬을 지령하는 유전자와 직접 연결되도룩 합성하고, 합성된 유전자를 발현용 플라스미드내에 삽입하여 대장균 단백질의 전반부 또는 후반부의 일부와 융합시키고 이 유전자의 발현을 프로모터로 조절하고 배양한 후, 배양한 배양세포로부터 인슈린 유사체 펩타이드가 융합되어진 형태의 단백질을 추출분리하고, 이를 시안화브롬으로 개열시켜서 인슐린 유사체의 A사슬 펩타이드와 B사슬 펩타이드를 동시에 분리정제시킨 후, 두 사슬의 펩타이드를 디설피드 결합으로 연결시켜 인체 인슐린 유사체를 생산한다.