일반기술

바실러스속 균주 유래의 혈전용해효소

본 기술은 바실러스 속(Bacillus sp.) 균주 유래의 혈전용해효소 및 그의 생산방법에 관한 것이다. 혈전을 용해시키기 위하여 유로키나제, 스트렙토키나제, 조직 플라스미노겐 활성화제(Tissue type plasminogen activator ; tPA), 지렁이 추출물 등이 사용되고 있다. 그러나 유로키나제, 스트렙토키나제, tPA등은 혈중 반감기가 낮고, 출혈등 부작용이 나타나며, 동시에 가격이 비싼 결점이 있다. 또한 혈전 이외의 신체부위를 분해하는 부작용도 있다. 본 기술은 발효된 멸치액젓으로부터 혈전용해능을 갖는 바실러스속 미생물을 분리하는 방법으로, 멸치액젓을 소금이 5%포함된 세균분리용 LB평판 배지에 도말하여 나타나는 전 미생물을 분리한다. 멸치액젓에서 얻은 미생물을 후술하는 피브린(fibrin)-함유 플레이트에 이식하여 배양한 후, 투명환을 생성하는 집락을 수집하므로써 혈전용해능을 갖는 미생물을 분리한다. 본 기술에 따른 미생물의 분리원으로 사용되는 멸치액젓은 통상의 방법으로 제조된 것을 사용할 수 있으며, 예를 들면 가정에서 제조하거나 또는 공장에서 대량 생산한 것을 사용할 수 있다. 그러나 생산공정 중에 장기 저장을 목적으로 하여 살균처리된 것은 사용할 수 없다.- 본 기술에 따른 효소가 종래의 여러 혈전용해효소와는 상이한 N-말단 아미노산 서열을 갖고 있음- 본 기술의 혈전용해활성을 갖는 미생물은 바실러스 속으로 밝혀졌으며 이 미생물은 피브린 용해활성이 우수하며 스킴밀크는 약간 분해하지만 제라틴, 혈액-아가(blood-agar) 플레이트에서는 젤라틴, 혈액을 분해하지 않는 혈전용해효소를 생산함- 미생물을 배양하여 혈전용해효소를 생산하는 것은 통상의 배양법에 의해 행할 수 있음- 미생물의 배양법 또는 효소의 분리 정제법에 특별한 제한은 없음