일반기술

키티나아제 생산성 길항균주 세라티아 프로테아마쿠란스 3095 및 이를 이용한 생물학적 방제법

본 발명은 신규한 키타나아제 생산성 길항균주 세라티아 프로테아마쿠란스 3095 Serratia proteamaculans 3095)(기탁번호 KCTC 8945P) 및 이를 이용한 생물학적 방제법에 관한 것으로 토양으로부터 분리 선발하여 동정한 본 발명 균주는 고온 및 광범위한 pH 영역에서 안정하고 난분해성 키틴도 단시간내에 분해하는 강한 키티나아제를 생산하는 뛰어난 길항효과가 있고 in vitro에서 식물병원균에 대해 강력한 길항력을 나타냄은 물론 in vitro에서 식물병원균의 발병을 강력하게 억제하는 뛰어난 효과가 있다.이상 토양으로부터 분리·선발하여 동정한 본 발명 신규한 키티나아제 생산성 길항균주 세라티아 프로테아마쿠란스 3095(KCTC 8945P)는 고온 및 넓은 pH 영역에서 안정하고 난분해성 키틴도 단시간내에 분해하는 강한 키티나아제를 생산하는 뛰어난 길항효과가 있고 in vitro에서 식물병원균에 대해 길항력을 나타냄은 물론 in vivo에서 식물병원균의 발병을 강력하게 억제하는 뛰어난 효과가 있으므로 생물농약산업상 매우 유용한 발명인 것이다.본 발명은 토착길항 미생물을 이용하는 자연농업의 저병해 경작기 토양을 분리원으로 하여 키티나아제 강력 분비세균들을 분리한 후 여러 식물병원균과 직접 혼합배양하면서 가장 큰 길항력을 나타내는 균주를 최종 선발하는 단계; 상기 가장 큰 길항력을 나타내는 키티나아제 생산균주를 그람염색과 전자현미경을 통해 형태학적 모양을 관찰하고 생화학적 성상시험, API 시험 및 Biolog 사의 동정시스템을 이용하여 세라티아 프로테아마쿠란스 3095로 동정하는 단계;30℃ CM배지(chitin-minimal; CM)에서 4일간 본 발명 균주 세라이타 프로테아마쿠란스 3095 Serratia proteamaculans 3095)를 진탕 배양하여 키티나아제를 생산하고 원심분리하여 회수한 후 상등액내 황산암모늄을 포화시킨후 원심분리하여 얻은 침전물을 포스페이트 버퍼에 녹인 후 투석하여 키티나아제 정제를 위한 조효소액을 준비하는 단계이다.