일반기술

팔미토일 보효소 Ａ를 이용한 포유동물의 혈청알부민의 과산화효소 활성을 증가시키는 방법

본 기술은 팔미토일 보효소 Ａ(palmitoyl coenzyme A)를 사람의 혈청알부민(HAS)에 처리하여 이들이 결합함으로써 사람의 혈청알부민의 삼차구조를 변형시켜, 사람의 혈청알부민의 과산화효소 활성을 증가시키는 방법에 관한 것이다. HSA에 리간드가 결합함에 따라 HSA는 CM-HSA로 변화되는 것이 알려져 있으므로, 팔미토일 보효소 A가 결합함에 따라 HSA가 CM-HSA로 변화될 것으로 예상할 수 있다. 따라서, 본 기술은 변화가 예상되는 CM-HSA의 과산화효소 활성을 측정하기 위하여 사용될 CM-HSA를 제조하였다. 즉, HSA 2.5㎎/㎖를 6M 구아니디움염산(Sigma Chemical Co., U.S.A.)을 포함한 100mM의 pH 4.0 초산나트륨 완충액, 100mM의 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide, Sigma Chemical Co., U.S.A.), 히드록실아민(hydroxylamine, Sigma Chemical Co., U.S.A.)의 조건하에 실온에서 반응시켜 CM-HSA를 제조하였다. 그런 다음, 20mM의 pH 7.4의 트리스-염산 완충용액 상에서 충분히 투석시켜, CM-HSA의 최종 농도가 30㎎/㎖이 되도록 하여 제조한다.- 본 기술은 팔미토일 보효소 Ａ를 이용한 사람의 혈청알부민의 과산화효소 활성을 증가시키는 방법임- 팔미토일 보효소 A를 사람의 혈청알부민에 처리함에 따라 HSA는 팔미토일 보효소 A와의 결합에 의하여 삼차구조가 변형되고, 삼차구조가 변형된 HSA는 생체내 존재하는 환원제인 Trx를 이용하여 지질과산화물을 효과적으로 제거할 수 있는 강력한 과산화효소 활성을 지님- 팔미토일 보효소 A의 처리에 의하여 유도된 삼차구조가 변형된 사람의 혈청알부민은 항산화제로서 의약품 및 식품에 유용하게 사용될 수 있음