일반기술

2',7'-dichlorofluorescin을 이용한 세포의 유리라디칼생성량 고속 측정방법

본 기술은 2',7'-dichlorofluorescin diacetate(DCFH-DA)가 세포의 산화성 스트레스 하에서 생성되는 여러가지 유리 라디칼들의 작용에 의해 산화되어 생기는 생성물인 2',7'-dichlorofluorescin(DCF)의 형광도를 측정함으로써 세포의 총체적인 산화성 스트레스의 측정을 가능하게 하는 방법에 관한 것으로 기질인 DCFH가 유리 라디칼들과 반응하여 생성되는 DCF의 형광도를 측정하는 방법이다.본 DCF의 형광도 측정방법은첫째, DCFH는 형광물질이 아니므로 background 수치가 높지 않아 비교적 민감한 방법이며, 둘째, 산화성 스트레스 하에서 생성될 수 있는 여러가지의 유리 라디칼들의 작용에 의해 반응이 일어날 수 있으므로 DCF 형광도의 측정에 의해 세포의 총체적인 산화 스트레스를 정량하는 것이 가능하며, 셋째, 분석에 수반되는 반응과정 및 측정과정이 간단하고 microplate fluorometer를 이용하면 다량의 시료를 한꺼번에 분석할 수 있는 뛰어난 효과가 있다.