일반기술

세포침투효율이 높은 구리이온 회복 슈퍼옥사이드 디스뮤테이스 융합 단백질 및 그 제조방법

본 발명은 재조합이나 화학적 결합 방법으로 단백질 수송 도메인과 결합된 슈퍼옥사이드 디스뮤테이스(SOD) 융합 단백질에 Cu 이온을 회복시킴으로써 이 융합 단백질의 세포내 도입능력을 획기적으로 증가시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 단백질 수송 도메인과 결합된 세포 침투성을 지닌 인간 Cu, Zn 슈퍼옥사이드 디스뮤테이스(Cu, Zn-Superoxide dismutase) 융합단백질의 세포내 도입능력을 구리이온 회복 방법을 이용하여 효율적으로 증가시키는 방법에 관한 것이다. 정제된 Tat-SOD 융합단백질에 구리이온을 첨가하여 충분한 양의 구리이온이 융합단백질에 결합하게 하고 결합하지 않은 자유 구리이온은 금속이온 킬레이터 수지(chelator resin)로 처리하여 제거함으로써 구리이온 회복 Tat-SOD(Copper ion recovered Tat-SOD)를 제조하였다. 구리이온 용액은 증류수를 이용하여 제조하거나 또는 SOD 융합단백질에 구리이온이 정상적으로 결합하는 것을 저해하지 않고, SOD 융합단백질 활성에 영향을 미치지 않는 완충용액을 이용하여 제조하는 것도 가능하다.