일반기술

화학물질의 독성과 그 유해성을 탐지할 수 있는 재조합발광 박테리아

본 발명은 화학물질의 독성과 그 유해성을 탐지할 수 있는 재조합 발광 박테리아에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 PR(박테리오파지 프로모터) 프로모터 유전자를 함유하는 재조합 플라스미드 pPRLUX를 제작하고, 이 플라스미드를 대장균에 도입하여 항시 발광성을 갖도록 형질전환시켜 화학물질의 독성 정도를 민감하게 평가할 수 있도록 한 재조합 박테리아 대장균 DH5@pPRLUX[KCTC 10240BP]에 관한 것이다.본 발명은 박테리오파지의 PR 프로모터 유전자를 함유하는 재조합 플라스미드 PRLUX를 대장균에 도입하여 형질전환된 재조합 발광 박테리아 대장균 H5@pPRLUX[KCTC 10240BP] 및 이를 이용한 화학물질의 독성 및 유해성 탐지 방법을 그 특징으로 한다. 이와 같은 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다. 본 발명은 다양한 화학물질의 독성을 평가할 수 있는 유전공학적으로 변형된 재조합 발광성 박테리아 대장균 DH5@pPRLUX[KCTC 10240BP]에 관한 것으로, 이 재조합 박테리아를 이용하여 지구상에 존재하는 다양한 화학물질의 독성과 그 유해성을 평가할 수 있다. 화학물질의 독성을 탐지할 수 있는 본 발명에 따른 신균주는 발광의 항시 유도를 위해 박테리오파지의 항시 발현 유도 프로모터인 PR 프로모터 부분을 생물학적 빛을 발할 수 있는 lux 오페론이 들어있는 재조합 플라스미드와 융합하고 이를 대장균에 도입하여 형질전환시켜 제작한 것이다.본 발명은 박테리오파지의 PR 프로모터 유전자를 함유하는 재조합 플라스미드 PRLUX를 대장균에 도입하여 형질전환된 재조합 발광 박테리아 대장균 H5@pPRLUX[KCTC 10240BP] 및 이를 이용한 화학물질의 독성 및 유해성 탐지 방법을 그 특징으로 한다. 이와 같은 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다. 본 발명은 다양한 화학물질의 독성을 평가할 수 있는 유전공학적으로 변형된 재조합 발광성 박테리아 대장균 DH5@pPRLUX[KCTC 10240BP]에 관한 것으로, 이 재조합 박테리아를 이용하여 지구상에 존재하는 다양한 화학물질의 독성과 그 유해성을 평가할 수 있다. 화학물질의 독성을 탐지할 수 있는 본 발명에 따른 신균주는 발광의 항시 유도를 위해 박테리오파지의 항시 발현 유도 프로모터인 PR 프로모터 부분을 생물학적 빛을 발할 수 있는 lux 오페론이 들어있는 재조합 플라스미드와 융합하고 이를 대장균에 도입하여 형질전환시켜 제작한 것이다. 이 재조합 플라스미드를 소유한 형질 전환체로부터 발현된 콜로니 중 성장에 따라 항시 발광을 나타내는 콜로니를 최종적으로 선별하였다. 상기 형질전환된 재조합 발광 박테리아 대장균 DH5@pPRLUX를 한국생명공학연구원 유전자 은행에 2002년 5월 3일자로 기탁하여 수탁번호 KCTC 10240BP를 부여받았다. 이러한 재조합 발광 박테리아 대장균 DH5@pPRLUX[KCTC 10240BP]는 PR 프로모터의 작동에 의해 항시 발광하는 성질을 갖게되며 다양한 화학물질과 수질 샘플의 독성과 유해정도를 민감하게 탐지할 수 있다.