일반기술

단백질 분해효소의 기질특이성을 측정하는 방법

본 기술은 형질전환된 미생물을 이용하여 단백질 분해효소의 기질특이성을 측정하는 방법에 관한 것이다. 본 기술의 단백질 분해효소의 기질특이성을 측정하는 방법은 단백질 분해효소를 코딩하는 유전자를 포함하는 벡터를 작제하는 단계와 효모의 골기체에 존재하는 막단백질의 골기체 표적 신호 부위와 막횡단 부위를 코딩하는 유전자, 특정 아미노산 서열을 가지는 기질 부위를 코딩하는 유전자 및 효모의 인버타아제(invertase)를 코딩하는 유전자를 포함하는 벡터를 작제하는 단계, 전기 두 가지 벡터를 이용하여 suc2 돌연변이종 효모를 동시에 형질전환시켜서 형질전환체를 제조하는 단계 및 전기 형질전환체를 자당을 유일한 탄소원으로 포함한 배지에서 배양하여 생존율을 측정하는 단계를 포함한다."본 기술에 의하면, 단백질 분해효소의 순수분리 및 정제과정이 필요하지 않고, 많은 비용이 소요되는 기질펩티드의 합성이 요구되지 않으므로, 간단하고, 경제적으로 단백질 분해효소의 유전자 동정 또는 특정 단백질 분해효소에 의해 절단되는 단백질의 유전자 동정에 널리 활용될 수 있을 것이다.결국, 본 기술의 주된 목적은 단백질 분해효소 발현벡터와 기질 발현 벡터로 동시에 형질전환된 suc2 돌연변이종 효모를 이용하여, 단백질 분해효소의 기질특이성을 측정하는 방법을 제공하는 것이다."