일반기술

CHO 세포에서 Bcl-2 단백질 과발현 및 배지내 Sodium Butyrate

간염B바이러스의 S 항원에 대한 항체를 생산하는 재조합 CHO 세포에 세포예정사를 억제하는 Bcl-2 단백질의 과발현을 유도할 수 있도록 Bcl-2 발현 벡터를 도입한다. Subcloning 방법을 통하여 Bcl-2를 과발현하는 세포를 확보하고 이 세포를 회분배양하는 과정에서 항체를 생산하는 단계에서 배지내에 외래단백질의 발현을 증가시키는 sodium butyrate를 첨가하고 sodium butyrate의 세포독성으로부터 유도되는 세포예정사를 Bcl-2 단백질의 과발현을 통하여 억제함으로써 최종항체생산성을 대조군과 비교하여 2배 이상 증가시킬수 있다. 본 기술은 외부단백질의 발현효율을 높일 수 있는 sodium butyrate의 세포독성에 대한 저항성을 세포에 부여하기 위하여 생존단백질로 알려져있는 Bcl-2 단백질을 항체생산 CHO 세포에서 과발현을 유도하여 재조합 단백질의 단위생산성 증가 및 배양 기간의 연장을 동시에 실현함으로써 최종 단백질생산성 증가를 가능하게 하는데 기술적 특징이 있다.