일반기술

항예정사 유전자로 형질전환되고 DHFR 유전자가 결핍된 신규한 CHO세포주, 그의 제조방법 및 상기 형질전환된 CHO숙주 세포를 이용한 목적단백질의 생산방법

목적단백질 생산을 위하여 산업적으로 널리 사용되는 DHFR이 결핍된 CHO DUKX 세포주를 무혈청 배지에서 부유배양이 가능하도록 적응하였다. 예정사를 억제하기 위하여 bcl-2, 아데노 바이러스 E1B-19K 유전자를 각각 도입한 후 subcloning과 western blotting을 통하여 과발현하는 CHO 숙주세포주를 확보하여, 회분배양을 통해 세포의 농도와 생존율을 측정하였다. Bcl-2, 아데노 바이러스 E1B-19K 단백질을 과발현하는 세포주는 세포 생존율이 대조군에 비하여 완만하게 감소하였으며, 상대적으로 예정사가 감소하였다.본 기술은 무혈청 배지에서 부유배양이 가능하고, 예정사에 저항성을 갖는 DHFR이 결핍된 CHO 숙주세포주를 제공하므로써, 이 CHO 숙주세포주를 이용하면 예정사에 저항을 갖는 다양한 목적단백질을 생산하는 재조합 CHO 세포주를 효율적으로 제작할 수 있게 하는데 기술적 특징이 있다.