일반기술

서머스 필리포미스(Ｔｈｅｒｍｕｓ ｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓ)Ｗａｉ 33 Ａ１

본 발명은 내열성 유당분해효소에 관한 발명으로 서머스 필리포미스 Wai33A1유래의 내열성 유당분해효소, 베타-글리코시다제에 관한 발명이다.즉, 본 발명은 서머스(Thermus sp.) 유래의 내열성 유당분해효소에 관한 것으로서 단순한 열처리를 통해서도 대부분의 중온성 숙주세포 유래 단백질을 쉽게 제거할 수 있어 정제과정이 매우 용이하고, pH 7.0, 70℃에서 70시간 이상 그 효소활성을 유지하는 한편 pH 5.0-6.0, 온도범위 80-90℃에서 최대 효소활성을 나타내어 그 내구성과 내열성이 우수한 유당분해효소를 제공하는 뛰어난 효과가 있다.본 발명의 베타-글리코시다제의 분리 및 유용성의 검증은 내열성 유당분해 효소를 생산하는 서머스를 선발하는 단계와 내열성 유당분해요소 유전자를 클로닝하는단계; 제한효소지도작성, 서브-클로닝 및 염기서열을 결정하는 단계; 유전자 염기서열을 분석하는 단계; 단백질을 대량발현 및 정제시키는 단계; 효소의 생화학적 특성을 규명하는 단계로 나누어 수행되었으며, 이러한 수행 단계를 통하여 유전자 염기서열을 밝히고, 이를 대장균에서 발현시켜 그 효소적 특성을 밝힘으로써 달성된 것이다.