일반기술

7-ACA 생물공정을 위한 산업용 효소

Cephalosporin 항생제의 원료물질로 사용하는 7-ACA 를 효소법으로 생산하기 위해서는 D-amino acid oxidase 와 glutaryl acylase 두 효소가 필요하다. 본 기술은 산소가 적은 상태에서도 높은 생산효율을 낼 수 있도록 D-amino acid oxidase 효소를 개발하였으며 효소의 안정성과 활성이 다른 효소보다 3배 이상증진되었다. D-amino acid oxidase 유전자는 대장균에서 과발현을 시켰다. Glutaryl acylase는 새로운 토양 미생물에서 분리하여 관련 유전자를 대장균에서 발현시켰다.효모에서 분리한 D-amino acid oxidase 효소에 bacterial hemoglobin 을 연결하여 대장균에서 생산이 가능하도록 하였다. 이 융합효소는 산소가 적은 상태에서도 고효율을 얻을 수 있도록 하여 효소고정화시에 매우 유리하다. 또한 국내 토양미생물에서 신규로 발견한 Pseudomonas spp. 균주의 glutaryl acylase 효소도 대장균에서 과발현을 유도할 수 있도록 하였다. 각각의 유전자는 대장균의 플라스미드에 들어있어서 유전자 재조합 기술적용이 수월하다.