일반기술

탄수화물의 합성 화학

동 기술 개발을 통해 두 가지의 성과가 획득 되었다. 첫 번째는 올리고당류(oligosaccharides)의 합성이며, 두 번째는 초분자 화학이다. 맞춤 형태학의 신당복합물(neoglycoconjugates) 획득을 위한 기법 개발, 즉 당류 리간드(ligands: 수용체에 결합하는 항체, 호르몬, 약제 등의 분자) 사이의 정확하게 명확한 거리를 획득하는 기술이 개발되었다. 올리고당류의 합성은 N-아세틸과 N-당뉴라민산(glycolylneuraminic acids)의 잔여물을 포함한다. N-당뉴라민산(Neu5Gc)은 가장 광범위하게 보급된 척추동물의 시알릭산(sialic acids) 중의 하나이다 ; 일반적인 조건에서는 인간과 새만이 합성할 수 없는 것이다. 종양과 연계된 인간 항원의 넓은 그룹은 암 세포에 의해 발현되는 당단백질의 올리고당류 체인 내 Neu5Gc의 존재와 관계된 HD-활동성를 갖는 항원을 포함한다. Neu5Gc의 새로운 유도체(다양한 O-보호 그룹을 갖는 에틸황글리코시르(ethylthioglycosides))에 기초한, 실험실에서 개발된 역전류기(spacer) 알코올 OH(CH2)3NHCOCF3의 sialylation 기법과 자유로운 제1기 알코올성 그룹(3, 4, 6-트리올)을 갖는 갈락토사민(galactosamine) 파생물은 이당류 Neu5Gca2-6GalNAca-OSp를 획득한다. sialylation의 문제점, 특히 제1기 알코올의 sialylation은 모든 천연의 시알사이드가 갖는 원자배열인 입체 특이성이다. 전통적 hexapyranoses의 파생물을 포함하는 다른 포도당화, 시알릭산 파생물 결핍 성질을 띤 그룹은 글리코시드 본드의 필수 원자 배열을 제공한다. Neu5Ac의 케이스에서, 천연 시알릭산만이 복합 시알올리고당류의 합성을 위해 항상 사용되며, 널리 보급된 비천연 b-아노머(b-anomer)를 갖는 아노머(anoners) 혼합물은 제1 당류 알코올의 sialylation에서 통상 형성된다. 우리는 Neu5Gc 파생물과 deblocking 후 이당류 Neu5Gca2-6GalNAca-OSp의 필요한 아노머(anomer)의 분리에 의한 제1 당류 알코올의 thirst sialylation을 성공하였다. 신당복합물(Neoglycoconjugates). 다양한 신당복합물의 합성에 보편적이고 편리하게 접근하는 것이 최근 동 실험실에서 개발되었다. 이것은 다양한 아미노 리간드(ligands:탄수화물 또는 비탄수화물 천연물의 효과기)가 전체적으로 활성화된 폴리아데닐산에 부착하는데 기초한 것이다.1. 부착을 위한 올리고당류의 레퍼토리는 sialylated 파생물 특유의 중요성을 포함하여 증대되었다.다양한 시알올리고당류의 사용은 합성 대 쌍촉각 모양의 이중시알로 undecaoligosaccharide, colominic산 일부, 분해-갱글리오사이드(lyso-gangliosides) 그리고 다른 촉각 모양의 폴리아크릴아미드르를 포함하는 AGP 올리고당류의 풀(pool) 같은 것에 적용 될 수 있는 기법의 다양성을 제시하였다. 2. 새로운 Label이 제안되었다. 따라서, 서브-폴리아크릴아미드(PAA)의 접합 - 세포(맴브레인과 세포질 성분) 쪽으로 낮은 비특수 수착을 지닌 digoxigenin 타입은 세포 ELISA를 위해 개발되었다. 당결합의 편리한 무선라벨링에 여러 가지 접근이 제안되었으며, 특히 티라민(tyramine) 선구세포의 요오드화와 방사성의 아미노산에 의해 표준 활성화된 선구세포의 삼중수소화 반응(tritiation)이 제안되었다. 니트로셀롤로오스아 금 표면 위의 고정화를 위한 황포함 결합이 개발되었다. 점액소 유사 결합(부분적으로 교차 결합되어 있으나 용해 가능한)이 합성되었으며, 미생물 블록커처럼 테스트되었다. 3. 미립자 라벨이 된 플루오레세인은 유동 세포형광계(cytofluorometr)를 사용한 세포 연구를 위해 개발되었으며, 자기 미립자는 세포 분리, 특히, 종양 세포, 하이브리도마, 세균 분해 바이러스 세포 분리를 위해 개발되었다. 4. 렉틴(lectins)와 안티 탄수화물 항체의 전기쟁반 분리를 위해 친화성 겔이 개발되었다. : Sug-PAA-알릴기에서 유도된 추가적인 층은 전통적 EF-겔 안으로 이입된다. 그러므로, 연구중인 단백질은 겔의 친화성 성분 내에 역시 고정된다. 또는 단백질의 휴지는 표준 EF 동안 분리되는 것임에 반하여, 그것의 운동은 다량 연기된다.5. 매끄러운 모세관(capillaries)과 커버 글래스를 포함한 어떠한 유리든지 신당복합물을 고정할 수 있는 신당복합물의 고정화를 위한 방법이 개발되었다. 동 방법은 표면위에 탄수화물 리간드(ligands)의 집단화 형성과 그것의 전체적 조밀도를 측정하는 것이 가능하게 했다. 변경된 유리는 선택 회전 연구를 위해 사용된다.