일반기술

인간 줄기 세포의 무동물혈청 배양 배지조성물 및 간세포로의 분화 유도 방법

본 발명은 동물혈청없이 인간혈청을 포함하는 세포 배양 배지 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 50-70 %(v/v) DMEM, 30-50 %(v/v) 영양 혼합물(Nutrient Mixture), 4-6 μg/ml 인슐린(insulin), 4-6 μg/ml 트랜스페린(transferrin), 4-6 ng/ml 소디움셀레나이트(sodium selenite), 10-7-10-9 M 덱사메타손(dexamethasone), 80-120 U 페니실린(penicillin)/800-1,200 U 스트렙토마이신(streptomycin), 5-15 ng/ml EGF, 5-15 ng/ml PDGF-BB, 5-15% 인체혈청를 포함하는 것을 특징으로 하는 인간 줄기세포 배양 배지 조성물, 이를 이용한 인간 줄기 세포의 배양 방법 및 간세포로의 분화 유도 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 세포분리의 초기단계에서부터 인간혈청을 사용함으로써 동물혈청을 없이 중간엽줄기세포의 배양 및 보존을 가능하게 하였으며 이를 통하여 중간엽줄기세포 배양시 사용되는 소태아혈청에 의한 안전성 문제를 해결하였다. 또한, 인간혈청을 사용할 때 나타나는 줄기세포의 증식능감소와 분화능감소를 해결하였다. 또한, 인간 중간엽줄기세포에서 분화된 간세포를 이용하여 간질환 치료에 유용한 세포치료제를 효과적으로 개발할 수 있다.본 발명은 동물혈청없이 인간혈청을 포함하는 세포 배양 배지 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 50-70 %(v/v) DMEM, 30-50 %(v/v) 영양 혼합물(Nutrient Mixture), 4-6 μg/ml 인슐린(insulin), 4-6 μg/ml 트랜스페린(transferrin), 4-6 ng/ml 소디움셀레나이트(sodium selenite), 10-7-10-9 M 덱사메타손(dexamethasone), 80-120 U 페니실린(penicillin)/800-1,200 U 스트렙토마이신(streptomycin), 5-15 ng/ml EGF, 5-15 ng/ml PDGF-BB, 5-15% 인체혈청를 포함하는 것을 특징으로 하는 인간 줄기세포 배양 배지 조성물, 이를 이용한 인간 줄기 세포의 배양 방법 및 간세포로의 분화 유도 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 세포분리의 초기단계에서부터 인간혈청을 사용함으로써 동물혈청을 없이 중간엽줄기세포의 배양 및 보존을 가능하게 하였으며 이를 통하여 중간엽줄기세포 배양시 사용되는 소태아혈청에 의한 안전성 문제를 해결하였다. 또한, 인간혈청을 사용할 때 나타나는 줄기세포의 증식능감소와 분화능감소를 해결하였다. 또한, 인간 중간엽줄기세포에서 분화된 간세포를 이용하여 간질환 치료에 유용한 세포치료제를 효과적으로 개발할 수 있다.본 발명의 주된 목적은 종래 안전성 문제를 해결할 수 있는 동물혈청없이 인간혈청을 포함하는 새로운 인간줄기세포 배양배지조성물 및 간세포유도배지조성물을 제공하는 데 있다. 본 발명의 다른 목적은 상기 배양배지조성물을 이용한 인간줄기세포의 배양방법및 간세포로의 분화 유도방법을 제공하는데 있다.