일반기술

형질전환 어류의 피씨알 분석을 위한 신속한 디앤에이 추출 방법

본 발명은 형질전환 어류를 신속하고 경제적으로 분석할 수 있도록 소형의 형질전환 어류로부터 미량의 조직을 대상으로 PCR에 사용될 수 있는 양질의 DNA를 추출하는 방법에 관한 것으로, 어류로부터 채취한 조직을 도데실황산나트륨 (sodium dodecyl sulfate; SDS)을 포함하는 염기성 완충용액 중에서 배양하고, 배양액에 비이온성 계면활성제를 포함하는 완충용액을 첨가하여 중화시키고, 이를 원심분리한 후 상등액을 회수하는 단계를 포함하는 DNA 추출 방법에 의하면, 소량의 어류 지느러미로부터 PCR에 이용할 수 있는 주형 DNA를 20 분 이내에 신속히 확보할 수 있으며, 동시에 순수 분리된 DNA와 전혀 차이 없는 양질의 PCR 주형 DNA를 제공하므로, 종래 기술에서 요구되는 복잡한 DNA 분리 과정, 고가의 단백질 제거 효소 및 수 시간에 걸친 반응시간이 필요 없게 되어, 종래의 형질전환 어류 분석에 소요되던 시간, 경비와 노력을 획기적으로 줄일 수 있다.어류로부터 채취한 조직을 도데실황산나트륨(sodium dodecyl sulfate; SDS)을 포함하는 염기성 완충용액 중에서 배양하고, 배양액에 비이온성 계면활성제를 포함하는 완충용액을 첨가하여 중화시키고, 이를 원심분리한 후 상등액을 회수하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 형질전환 어류의 PCR 분석을 위한 어류 조직으로부터 DNA 추출 방법. 어류의 지느러미 조직을, 도데실황산나트륨(SODIUM DODECYL SULFATE; SDS)을 포함하는 PH 11의 염기성 완충용액 중 90 ℃ 이상에서 10 분 내지 20 분 동안 배양하고, 배양액에 비이온성 계면활성제로서 NP 40(NONIDET P-40; OCTYLPHENOXY POLYETHOXY ETHANOL) 및 TWEEN 20을 1:1의 비율로 포함하는 완충용액을 첨가하여 중화시키고, 이를 원심분리한 후 상등액을 회수하는 단계로 이루어지는, 형질전환 어류의 PCR 분석을 위한 DNA 추출 방법.