일반기술

채소류 모잘록병균에 길항하는 바실러스 에히멘시스

본 발명은 채소류 모잘록병균에 우수한 길항력이 있는 바실러스 에히멘시스(Bacillus ehimensis) YJ-3(한국과학기술원 유전공학센터 기탁번호 KCTC 18034P)에 관한 것이다. 본 발명의 바실러스 에히멘시스(Bacillus ehimensis) YJ-3은 채소류 모잘록병균인 라이족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG-4 및 피시움 울티뭄(Pythium ultimum)에 길항하는 미생물로 채소류 뿌리에서 분리·선별한 근권길항 미생물이다.그리고 본 발명의 미생물제는 채소류의 근권에 토착화·우점화되기가 쉽고 뿌리에 친화성을 가지고 있기 때문에, 뿌리 주변에 서식하고 있는 모잘록병균 및 각종 병원성 진균의 생육을 억제하거나 사멸시킬 수 있으므로 채소류 모잘록병 및 각종 병원성 진균에 의한 병해를 미생물학적으로 용이하게 예방할 수 있는 등의 효과를 발휘한다.이하 본 발명의 바람직한 실시예를 첨부한 도면에 의거하여 더욱 상세하게 설명하며, 본 발명이 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.본 발명의 채소류는 경상남도 창녕, 경상북도 성주, 고령 일원에서 일반적으로 재배되고 있는 무, 배추, 수박, 참외, 대파, 마늘 등 채소류의 뿌리를 수집하여 균원시료로 이용하였다.근권미생물은 균원시료인 뿌리를 잘 세척하고 그 크기가 1mm가 되게 절단하여 그 1g에 0.85% NaCl 멸균수 10ml를 첨가하고 3단 희석한 후, NA(Nutrient agar) 배지에 100㎛씩 도말한 후 37℃에서 3일간 배양하여 순수 독립 colony만을 분리하여 근권미생물로 사용하였다.모잘록병균은 라이족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG-4 및 피시움 울티뭄(Pythium ultimum)을 이용하였고, 이들 병원성 곰팡이 균주는 PDA(Potato Dextrose Agar) 배지상에서 28℃ 조건으로 4-10일간 배양한 다음 4℃에서 보관하면서 사용하였다. 모잘록병균에 대한 길항력조사는 생육저지대 측정법(pairing plate culture)을 이용하였다.즉 PDA 배지에서 키운 모잘록병 균체 덩어리를 PDA 배지 중앙에 올려놓고 가장자리 4곳에 순수분리한 미생물을 한백금이씩 접종하여 30℃에서 7∼10일간 배양한 후 모잘록병균의 균사체의 생장억제 정도(inhibition zone)를 조사하여 생성된 클리어 존(clear zone)의 크기가 큰 미생물을 길항균으로 선발하였다.길항미생물의 동정은 첫째 일반적인 동정법인 버지스 매뉴얼(Bergey's Mannual of Systematic Bacteriology)의 방법에 준하여 미생물의 형태학적, 배양학적, 생리·생화학적 특성을 조사하였으며, 둘째, 미생물의 세포벽의 지방산의조성으로 자동 동정하는 미디(MIDI)사의 세포벽 지방산 분석법(Sherlock system Microbial Identification system)을 이용하는 방법, 셋째, 16S 리보솜 알엔에이 부분 염기서열 결정(16SrRNAsequence ;Jukes and Cantormodel,Neighbor- joining method)을 통한 분류 방법으로 동정하였다.