일반기술

갯지렁이로터 분리한 신규 프로테아제

본 발명은 피브린 분해 활성을 갖는 신규한 프로테아제와 그 분리 및 정제 방법에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명의 프로테아제는 갯지렁이 (Periserrula leucophryna)로부터 순수분리되며, 약 28 kDa에서 약 30 kDa의 분자량을 갖고, 계면활성제, 중금속, 저온, 극심한 pH 조건, 극심한 산화성 환경 또는 환원성 환경에서도 활성을 유지하는 프로테아제이다. 따라서, 본 발명의 프로테아제는 혈전 용해제, 의류용 또는 콘택트 렌즈용 세제의 성분으로 유용하며, 식품, 사료, 직물, 천연 가죽 등의 가공 및 유기 폐기물의 처리에 유용하게 사용될 수 있다.본 발명은, 불안정하거나 극심한 물리적, 화학적 조건 하에서도 단백질 분해 활성을 유지하며 갯지렁이 (Periserrula leucophryna)로부터 분리되는 프로테아제를 제공한다.또한, 본 발명은 상기 프로테아제를 갯지렁이로부터 분리, 정제하는 방법을 제공한다.또한, 본 발명은 상기 프로테아제를 포함하는 혈전 용해제, 의류용 또는 콘택트 렌즈용 세제를 제공하며, 상기 프로테아제를 이용하여 식품, 사료, 직물, 천연 가죽을 가공하는 방법 및 유기 폐기물을 분해하는 방법을 제공한다. 본 발명은 갯지렁이 (Periserrula leucophryna)로부터 분리된 프로테아제를 제공한다. 상기 프로테아제는 약 28 kDa에서 30 kDa의 분자량을 가지며 피브린 분해 활성이 있는 프로테아제로서, 계면활성제 또는 중금속이 존재하는 환경, 극심한 pH 조건, 극심한 산화성 또는 환원성 환경에서도 활성을 유지하며 저온에서도 효소 활성이 유지된다.또한, 본 발명은 상기 프로테아제를 갯지렁이로부터 분리, 정제하는 방법을 제공한다. 구체적으로, 갯지렁이로부터 조효소액을 얻고, 이를 황산암모늄 침전법으로 정제한 후, 황산암모늄 활성분획을 다양한 칼럼 크로마토그래피를 조합 사용하여 정제함으로써 본 발명의 프로테아제를 분리할 수 있다. 이때, 상기 조효소액을 약 50℃에서 가열 처리하면, 프로테아제 활성을 보다 많이 분리할 수 있어 바람직하다. 또한, 상기 황산암모늄 분획 중 30～80% 황산암모늄 분획에서 본 발명의 프로테아제 활성이 나타나므로 이 분획을 칼럼 크로마토그래피에 사용하는 것이 바람직하고, 상기 칼럼 크로마토그래피는 겔 여과 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 벤자미딘 (benzamidine) 친화 크로마토그래피의 순서로 수행하는 것이 바람직하다.