일반기술

효모 발현 시스템을 이용한 인터루킨-18 단백질의생산방법

* 원리 및 작용방식 본 기술은 효모 발현 시스템을 이용하여 인터루킨-18 단백질의 생산방법이다. 본 기술은 GPD 프로모터 또는 AG 프로모터, 세포외 분비신호서열, 사이토카인 유전자 및 전사종결신호 서열을 포함하는 벡터, 이를 포함하는 형질 전환주 및 재조합 인터루킨-18 단백질을 제공한다. * 개발 배경 인터루킨-18은 인터페론-γ의 생성을 유도하고, NK세포의 세포독성을 증강시키고, 헬퍼 T 세포의 활성을 촉진시키고, 다른 종류의 사이토카인을 생성시킬 뿐만 아니라 B 세포에 의한 IgE 생성을 억제시킨다. 이러한 인터루킨-18의 활성으로 항생제 또는 항암제로써의 그의 유용성이 제시되고 있다. 인터루킨의 의학적인 유용성으로 인하여 다량의 인터루킨-18단백질을 생산하고자 하는 시도가 계속되고 있으나 이종시스템에서 발현시킬 시 엔도톡신에 의한 오염 문제가 대두되었고 마우스 인터루킨-18 단백질을 발현시킨 경우 그 활성이 일부만 나타나, 성숙 단백질의 형성에 어려움이 있는 것으로 추정된다. 그 외에도 진핵발현시스템을 이용한 재조합 사이토카인을 발현하는 연구가 이루어졌으나, 사람 인터루킨-18을 진핵시스템에서 생물학적 활성을 가진 형태로 성공적으로 발현시킨바가 없는 실정이다. * 중요성 및 독창성 본 기술은 효모에서 사이토카인을 세포외로 발현시켜 재조합 사이토카인을 다량 생산할 수 있는 방법을 제공하여 바이러스 및 세균감염에 대한 면역증가용 조성물, 항암조성물로 재조합 인터루킨-18 단백질을 사용할 수 있도록 할 뿐 아니라 인터루킨-18 항체제조를 위한 항원으로 사용할 수 있다.* 적용제품 및 경쟁제품 본 효모 발현 시스템을 이용하여 인터루킨-18 단백질의 생산방법은 GPD 프로모터 또는 AG 프로모터, 세포외 분비신호서열, 사이토카인 유전자 및 전사종결신호 서열을 포함하는 벡터를 제공할 뿐 아니라 이 벡터를 포함하는 형질전환주를 제공하고 이에서 발현된 재조합 단백질을 제공한다. 또한 이종유전자 GPD프로모터또는 AG프로모터, 세포외 분비신호서열 및 전사종결신호를 포함하는 벡터에 도입하여 재조합 벡터를 제조하고, 이를 효모에 형질전환하고 이 형질전환 된 효모를 배지에서 배양하여 이종단백질을 생산할 수 있다.* 효과- 높은 생물학적 활성을 유지하는 사이토카인을 세포외로 다량 생산할 수 있다.- 이 사이토카인을 면역증강 및 항암을 위한 용도로 사용할 수 있다.