일반기술

엔-포밀-리신의 제조방법 및 이를 이용한 글리케이션화단백질의 분석방법

본 발명은 L-리신 염산과14 C-L-리신을 포름산에 용해시킨 후 아세트산무수물과 반응시키는 단계와, 상기의 반응액을 수산화칼륨용액과 반응시킨 후 증발, 여과시키는 단계와, 상기의 여과액을 양이온교환 컬럼에 용리시켜 분취하여 N-포밀-리신을 분리한 후 정성하는 단계와, 상기의 N-포밀-리신 분취액을 결정화시키는 단계를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 [14 C]-N-포밀-리신의 제조방법을 제공한다. 또한, 본 발명을 단백질 분석시료, 당류, 디에틸렌트리아민펜타아세트산 및 [ 14 C]-N-포밀-리신을 혼합하여 여과한 후 배양하는 단계와, 상기의 배양된 반응혼합액을 채취하여 여과지에 점적하여 트리클로로아세트산으로 세척하여 건조시키는 단계와, 상기의 건조된 반응혼합물을 액체 신틸레이션 계수기로 측정하는 단계를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 [14 C]-N-포밀-리신를 이용한 글리케이션화 단백질의 분석방법을 제공한다.본 발명에 의해 [14 C]-N-포밀-리신를 이용하여 단백질의 글리케이션 반응이 진행됨에 따라 형성되는 단백질의 교차결합도를 정량 분석할 수 있을 뿐만 아니라, 다양한 약제, 천연물, 화학물질, 식용품 등이 갖는 단백질변성에 대한 억제능력을 정확하고 간편하게 조사할 수 있다. 또한 단백질 변성 억제활성을 가진 천연물을 효과적으로 탐색하고 이를 통하여 상품화할 수 있으며, 단백질 변성을 쉽게 측정할 수 있는 키트(kit)를 개발하는데 유용하게 사용될 수 있다.