일반기술

외래 항원 단백질을 안정적으로 발현하는 유전자 전이된 ＢＬＣＬ 의 제조방법

외래 항원 유전자를 레트로바이러스 벡터에 클로닝하여 재조합 레트로바이러스 벡터를 제조하는 단계; 상기 재조합 레트로바이러스 벡터를 에코트로픽 바이러스 패키징 세포주에 전이시킨 후 선택배양하는 단계; 상기 배양 상등액의 재조합 레트로바이러스를 앰포트로픽 바이러스 패키징 세포주로 감염시킨 후 선택 배양하는 단계; 배양조에 희석 배양하여 고역가의 재조합 레트로바이러스를 생산하는 단세포 클론의 바이러스 패키징 세포주를 확립하는 단계; 및 상기 고역가의 재조합 레트로바이러스를 BLCL에 3회 이상 연속하여 전이시킨 후 선택배양하는 단계를 포함하는, 외래항원 단백질을 안정적으로 발현하는 유전자 전이 BLCL 세포주를 제조하는 방법 및 그 방법에 의해 제조된 유전자 전이 BLCL 세포주에 관한 것이다. 외래 항원 유전자를 레트로바이러스 벡터에 클로닝하여 재조합 레트로바이러스 벡터를 제조하는 단계; 상기 재조합 레트로바이러스 벡터를 에코트로픽 바이러스 패키징 세포주에 전이시킨 후 선택배양하는 단계; 상기 배양 상등액의 재조합 레트로바이러스를 앰포트로픽 바이러스 패키징 세포주로 감염시킨 후 선택 배양하는 단계; 배양조에 희석 배양하여 고역가 의 재조합 레트로바이러스를 생산하는 단세포 클론의 바이러스 패키징 세포주를 확립하는 단계; 및 상기 고역가의 재조합 레트로바이러스를 BLCL에 3회 이상 연속하여 전이시킨 후 선택배양하는 단계를 포함하는, 외래 항원 단백질을 안정적으로 발현하는 유전자 전이 BLCL 세포주를 제조하는 방법을 제공한다.재조합 레트로바이러스를 사용하여 수 회 연속적으로 바이러스를 전이시키는 과정을반복함으로서 외래 항원 단백질을 발현하는 BLCL을 안정적이고 신뢰성있게 확립할 수 있다. 상기와 같이 제조된 외래항원을 발현하는 BLCL은 외래항원에 특이적으로 유도된 CTL의 특성을 분석을 위한 표적세포 및/또는 바이러스성 및 종양항원에 특이 적인 시험관 내 CTL반응의 유도를 위한 항원제시세포 및/또는 특정 MHC에 결합하는 바이러스성 및 종양 항원 펩티드를 추출하거나 조사하기 위한 세포 및/또는 항원-특이 사람 항체를 생산하기 위한 항체생산세포로서 사용될 수 있어 다양한 생명공학적 의료 기술 산업에 이용될 수 있다.