일반기술

벼 유래의 재조합 ＧＳＴ 단백질 및 상기 단백질을 대량생산하는 방법

본 발명은 벼 유래의 재조합 GST(glutatione S-transferase) 단백질 및 상기 단백질을 대량 생산하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 (a) 분자량 28kDa; (b) 최적 pH 9; (c) 최적 온도 45℃; 및 (d) CDNB(1-chloro-2,4-dinitrobenzene), ETA(ethacrynic acid), EPNP(1,2-epoxy-3-(ρ-nitrophenoxy)propane) 및 CP(cumene hydroper oxide)에 대한 기질 특이성의 특성을 갖는 것을 특징으로 하는 벼 유래의 재조합 GST 단백질 및 상기 단백질을 암호화하는 유전자를 포함하는 재조합 발현 벡터 pET-rGST를 이용하여 상기 단백질을 대량 생산하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법에 따라 대장균 내에서 대량 생산된 벼 유래의 재조합 GST 단백질은 제초제, 농약 또는 약물 등에 의한 식물 세포 내 해독 대사 과정 분석에 유용하게 이용될 수 있다. 또한, 표적분자 또는 종양 마커(cancer marker) 로서 화학요법 분야의 진단 및 이를 필요로 하는 다양한 분야에 유용하게 이용될 수 있다.본 발명에서는 벼로부터 GST유전자를 클로닝하여 상기 유전자를 대량 발현시키기 위한 재조합 발현 벡터를 제조하였다. 또한, 상기 벡터로 형질전환시킨 대장균에서 재조합 GST 단백질이 발현됨을 확인하고 , 상기 단백질을 분리·정제하여 이의 특성을 규명하였다. 본 발명에 따른 방법에 따라 대장균 내에서 대량 생산된 벼 유래의 재조합 GST 단백질은 제초제, 농약 또는 약물 등에 의한 식물 세포 내 해독 대사 과정 분석에 유용하게 이용될 수 있다. 또한, 표적분자 또는 종양 마커(cancer marker)로서 화학요법 분야의 진단 및 이를 필요로 하는 다양한 분야에 유용하게 이용될 수 있다