일반기술

불포화 지방산 리폭시지네이즈 대사체의 대량 정제 방법

본 발명은 불포화 지방산 리폭시지네이즈 대사체의 정제 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 피부 염증의 억제및 피부 이상 증식 억제 효과가 있다고 알려진 불포화 지방산 리폭시지네이즈 대사체를 대량으로 분리, 정제할 수 있는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 대량 정제 방법에 의하여 기존의 방법에서 보다 높은 수율로 불포화 지방산대사체를 분리, 정제할 수 있다. 본 발명에서는 불포화 지방산 리폭시지네이즈 대사체를 대량 정제하는 방법을 제공하였다. 본 발명의 대량 정제 방법에 의하여, 피부 염증의 억제 및 피부 이상 증식 억제 효과가 있는 불포화 지방산 리폭시지네이즈 대사체를 대량으로 분리, 정제할 수 있다. 상기 대량 정제된 대사체는 연구의 특성상 다량이 요구되는 임상 관련 연구에 유용하게 이용될 수 있으며, 다양한 질병 치료를 위한 신약 개발에도 이용될 수 있다.본 발명의 목적은 피부 염증의 억제 및 피부 이상 증식 억제 효과를 갖는 불포화 지방산 리폭시지네이즈 대사체를 대량으로 분리, 정제하는 방법을 제공하는 것이다. 이를 위해1) 불포화 지방산을 용해시키는 단계;2) 상기 불포화 지방산 용해액에 리폭시지네이즈를 첨가하여 반응시키는 단계;3) 상기 반응액에 유기용매를 첨가하여 불포화 지방산 리폭시지네이즈 대사체를 추출하는 단계;4) 상기 추출액에 포함된 불포화 지방산 리폭시지네이즈 대사체를 환원시키는 단계; 및5) 극성 고정상과 비극성 이동상으로 이루어지는 순상(normal phase)컬럼에서, 상기 환원된 불포화 지방산 리폭시지네이즈 대사체가 포함되어 있는 용액을 이동상으로 하고, 유출용매(elution buffer)로 비극성 용매를 사용하여 6-8㎖/분(minutes)의 유출속도로 HPLC를 수행하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 불포화 지방산 리폭시지네이즈 대사체의 대량 정제 방법을 제공한다.