일반기술

경쟁적 중합효소 연쇄반응을 이용한 비피더스균의 정량방법

본 발명은 지금까지 βig-h3를 정량하기 위해 인간 βig-h3를 표준물질로하여 ELISA 등의 방법을 사용하여 측정하는 방법에서 βig-h3 단백질을 대량으로 많이 얻을 수 없어서 비용이 많이 드는 단점을 해결하고자 한다.본 발명에 의해 1) 비피더스균의 16S rRNA의 유전자구조체를 이용하여 내부표준물질(competitor)을 제작하는 단계; 2) 비피더스균의 16S rRNA의 유전자와 내부표준물질의 cPCR 산물을 정량하여 표준곡선을 작성하는 단계; 및 3) 측정하고자 하는 비피더스균의 DNA를 추출하여 정해진 농도의 내부표준물질과 함께 cPCR을 수행한 후, 상기 단계 2)에서 얻은 표준곡선을 이용하여 비피더스균을 정량하는 단계로 구성되는 새로운 비피더스균의 정량방법을 제공한다.본 발명의 βig-h3 측정법은 마우스 βig-h3, βig-h3 D-IV(1x) 또는 βig-h3 D-IV(4x)를 표준단백질로 사용하므로 비용이 저렴하고 다양한 체액에서 βig-h3의 농도를 정확하게 진단할 수 있으며, 검체에서의 βig-h3 농도는 TGF-β와 관련되는 의학적 증상들인 여러 가지 신장 질환, 간질환 및 류마티스 질환을 조기에 예민하게 반영하므로 상기 질환의 진단, 손상 정도 및 진행 정도를 반영하는 효과적인 검사 방법으로 유용하게 사용될 수 있다. .