일반기술

엽록소형광분석법을이용한형질전환식물체를선별하는방법

본 발명은 플래스틱 배양접시 상에서 배양되고 있는 식물체를 암적응시킨 뒤 형광분석기를 이용하여 (Fm-Fo)/Fo 값을 구하며, 그 값이 변화가 없는 경우에는 형질전환된 식물체로, 그 값이 저하되면 형질전환되지 않은 것으로 판정하는 형광분석법을 활용하여 형질전환된 식물체를 2일내에 선별하는 방법에 관한 것이다. 이러한 판정은 분자생물학적으로, 또한 3주 이상 배양하여 얻어지는 분화된 식물체에서도 확인되었다. 또한 배양접시의 뚜껑을 열지 않은 채 직접 측정이 가능하므로, 측정에 사용하였던 동일한 시료를 필요시 여러 번 측정할 수 있다는 장점이 있다. 본 발명은 형질전환된 식물체를 선별하기 위한 항생제나 제초제의 사용농도 및 시간을 결정할 수 있었고, 토양에서 자라고 있는 식물체에 대해서도 적용될 수 있다.본 발명은 엽록소 형광분석법을 이용하여 형질전환된 식물체를 선별하는 방법에 관한 것이다. 돌연변이체나 교잡을 통하여 새로운 작물을 개발하여 온 농업분야에서의 육종은 유전공학 기법을 활용하여 더욱 다양한 품종을 개발할 수 있게 되었다. 그런데 항생제나 제초제등에 의해 식물은 생리활성이 저해되고, 광합성능이 저하되며, 궁극적으로는 죽는다. 형질전환된 식물체를 선별하는 방법을 역으로 말하면 형질전환되지 않은 시료를 제거하는 것이다.본 발명은 형질전환 조작을 한 조직을 항생제 또는 제초제가 함유된 줄기 유도배지에 접종시키고, 형광분석하여 Fo와 Fm값을 측정한 다음 다시 2일간 배양하고, 형광분석하여 Fo와 Fm값을 측정하여, 형질전환 여부를 판별함을 특징으로 하는 형질전환 식물체의 선별방법이다. 본 발명은 형질전환 여부의 판별은 (Fm-Fo)/Fo값의 변화가 없을 때 형질전환 된 것으로 판별함을 특징으로 하는 형질전환 식물체의 선별방법을 사용한다.