일반기술

동물세포 내에서 성장인자에 의하여 유도되는활성산소종의 생성을 억제하는 방법

본 발명은 동물 세포 내에서 성장인자에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성을 억제하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 세포 내에서 성장인자에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성을 억제하는 방법은 ΒPIX 유전 또는 NOX1 유전자와 상보결합할 수 있는 SIRNA를 세포 내로 도입시켜, 각각 ΒPIX 유전자 또는 NOX1 유전자의 발현을 억제하는 단계를 포함한다. βPix와 성장인자에 의해 유도되는 활성산소종의 생성과의 직접적인 연관성을 밝히기 위하여, βPix 유전자와 상보결합할 수 있는 siRNA를 제작하여 직접 세포에 함입시키거나 전기 siRNA를 발현시키는 siRNA 발현벡터를 동물세포에 형질전환시킨 다음, EGF를 처리하여 활성산소종의 생성여부를 분석하였다. 그 결과, 활성산소종이 대조군과 비슷한 수준으로 발생함을 관찰할 수 있었으며, 이를 토대로 전기 siRNA를 직접 세포에 함입시키거나, 또는 전기 siRNA를 발현시키는 발현벡터를 도입시킴으로써 동물세포에 활성인자 처리시 유해한 활성산소종의 생성을 억제하는 방법을 개발하게 되었다.또한, βPix 단백질과 상호작용을 하는 것으로 알려진 Nox1의 경우에도 유전자의 발현을 억제시키면 성장인자에 의해 유도되는 활성산소종의 생성을 억제할 수 있음을 관찰할 수 있었으며, Nox1이 βPix의 하위에서 작용함을 알 수 있었는 바, Nox1 유전자와 상보결합할 수 있는 siRNA를 직접 세포에 함입시키거나, 전기 siRNA를 발현시키는 siRNA 발현벡터를 도입시킴으로써 성장인자에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성을 억제하는 방법을 개발하게 되었다.본 발명의 세포 내에서 성장인자에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성을 억제하는 방법을 사용할 경우, 외상치료 등에 사용되는 EGF 또는 PDGF 등 성장인자의 처리에 의해 유도되는 유해한 활성산소종의 과다생성을 억제할 수 있으므로, 보다 안전한 외상치료뿐만 아니라 성장인자를 이용한 각종 질병치료와 노화방지 연구에 널리 활용할 수 있을 것이다. 본 발명의 동물세포 내에서 성장인자에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성을 억제하는 방법을 사용할 경우, 외상치료등에 사용되는 EGF 또는 PDGF 등 성장인자의 처리에 의해 유도되는 유해한 활성산소종의 과다생성을 억제할 수 있으므 로, 보다 안전한 외상치료뿐만 아니라, 성장인자를 이용한 각종 질병치료와 노화방지 연구에 널리 활용할 수 있을 것이다.