일반기술

느타리 갈색무늬병 병원균 슈도모나스 톨라시 검출을 위한 핵산 프로브와 검출법

* 구성 및 원리 본 기술은 병원균을 정확하고 빠르고 민감하게 검출하는 기술에 속한다. 병원균을 정확하고 빠르게 그리고 민감하게 검출하는 기술은 인간의 병을 다루는 의학, 동물의 병을 다루는 수의학 및 식물의 병을 다루는 식물병학에서 매우 중요하게 생각되는 기술로 병의 예방와 치료에 전제조건이 되는 병의 정확하고 빠른 진단단의 핵심이 되는 기술이다. 본 기술은 DNA 절편의 총 2318상의 염기서열이 결정되었고, 이 염기서열로부터 여러개의 가능한 프라이머를 제작하여 DNA 증폭조건, P. tolaasii에 대한 특이성확인, 세균세포를 직접 이용한 PCR법 확립, 검출민감도를 최대화하는 nested-PCR 방법확립, PCR를 실시하기 전에 여러 가지 다양한 시료로부터 P. tolaasii 항체를 이용한 immunocapture 후 PCR를 실시하는 IC-PCR방법확립을 통해 어떤 시료로부터도 P. tolaasii를 검출할 수 있는 방법이다. (자세한 내용은 명세서 참조)* 기술적 배경 Psuodomonas tolaasii는 주요 재배버섯인 양송이(Agaricus bisporus), 느타리(Pleurotus ostreatus), 팽이(Flammulius velutipes), 그리고 표고버섯 (Lentinus edodes) 등에 갈색무늬병(Brown blotch, 褐斑病)을 일으켜 매년 막대한 경제적인 손실을 가져오는 인공 재배버섯의 가장 중요한 병원균이다. P. tolaasii가 일으키는 갈반병은 전 세계적으로 가장 많이 생산, 소비되는 양송이 수량손실의 가장 중요한 생물적 요인으로 보고되었으며(Rainey 등, Advances in Plant Pathology 8:95-117, 1992), 우리 나라의 경우 전체 버섯생산량의 약 74%를 차지하는 느타리에 발생하여 큰 피해를 줄 뿐만아니라 버섯재배 자체를 위협하고 있다.* 독창성 및 우수성 본 기술의 느타리 갈색무늬병 병원균 슈도모나스 톨라시 검출을 위한 핵산 프로브와 검출법은 P. tolaasii를 단일 균총으로부터 바로 정확히 동정할 수 있다는 점에서 그 기술적 우수성이 있다.* 적용제품 및 관련시장 본 기술의 느타리 갈색무늬병 병원균 슈도모나스 톨라시 검출을 위한 핵산 프로브와 검출법은 느타리 버섯을 비롯한 각종 버섯재배 산업분야에 적용될 것이며, 그 관련시장도 버섯재배 및 유통시장이 될것으로 판단된다. * 특징 및 장점 본 기술은 다음과 같은 특징 및 장점을 갖는다. 첫째, P. tolaasii를 단일 균총으로부터 바로 정확히 동정할 수 있다. 둘째, 느타리 및 다른 버섯재배에 사용하는 물에 P. tolaasii의 오염여부를 검사할 수 있다. 셋째, 느타리 및 다른 버섯의 재배재료인 종균, 배지 등으로부터 P. tolaasii를 검출할 수 있다. 넷째, 느타리 및 다른 버섯 재배동안 버섯 및 배지로 부터 P. tolaasii를 검출할 수 있다.5. 여러 다른 시료로부터 P. tolaasii를 검출할 수 있다.