일반기술

Mlc 단백질을 과발현하여 대장균을 고농도로 배양하는 방법

대장균에서 mlc 유전자는 -10부위가 CACCAT, 시작 코돈이 GUG, Mlc 단백질 결합 부위의 존재로 인하여 세포 내에서 매우 게한된 농도로 존재한다고 알려져 있었다. SD서열과 -10부위를 바꾸고 시작 코돈을 ATG로, Mlc binding site를 불활성화한 돌연변이(SR754)를 만들고 외래 단백질은 beta-galactosidase와 GFPuv를 이 돌연변이에서 생산한 결과 기존에 비해 각각 4-8배 및 6-10배 더 발현이 증대됨을 확인할 수 있었다. 이러한 결과를 통해서 향상된 당 이용성을 나타내는 Mlc 과발현 균주인 SR754가 유용한 단백질을 생산하는 데 중요한 숙주로 이용될 가능성이 있음을 보였다.○ 기술의 독창성: 아세트산의 축적을 막는 돌연변이체를 만든 분자생물학적 기법으로, 조절단백질인 Mlc를 과발현시킨 방법으로 기존의 탄소 대사 관련 유전자를 조작한 것과 차별된다. ○ 기술의 우수성: 특별한 발효 기법이나 기기, 시설에 의존할 필요가 없이 대장균을 고농도로 배양할 수 있으므로 경제적이다. 또한 기존의 발현 시스템으로 사용하여 생산성 향상을 입증하였다. ○ 기술의 활용 가능성: 재조합 단백질 및 발현 벡터 시스템에 따라 최적 발현에 필요한 배양 조건의 차이가 있을 것으로 보여 이에 대해 간단한 선행 연구만 있으면 바로 응용 가능할 것이라 본다. ○ 관련 유사기술과 비교한 시장 경쟁성: 전반적으로 생명공학 시장이 팽창하고, 재조합 단백질의 보다 경제적인 생산이 중요해진만큼 경쟁성이 있다고 본다. ○ 본 기술의 이전사업화 조건 등을 고려한 경제성: 본 특허는 다른 기관과 연계되지 않아 기술이전사업화가 매우 용이하다.