일반기술

재조합 인체 부갑상선 호르몬을 생산하는 형질전환효모 및 재조합 인체 부갑상선 호르몬의 생산방법

본 발명은 효모로부터 인체 부갑상선 호르몬(hPTH)을 효율적으로 생산하는 방법에 관한 것으로 효모 아스파틱 단백질 분해효소 앱신1,2와 3에 대한 유전자 YPS1,YPS2와 YPS3가 파쇄된 효모 균주를 제작하여 인체 부갑상선 호르몬의 분해를 방지하여 완전한 형태의 부갑상선 호르몬을 고효율로 생산하는 방법을 제공한다○기술성본 발명은 효모 Saccharomyces cerevisiae로부터 인체 부갑상선 호르몬을 효율적으로 생산하는 방법에 관한 것으로 효모 아스파틱 단백질 분해효소 앱신1,2와 3에 대한 유전자 YPS1,YPS2와 YPS3가 파쇄된 효모 균주를 개발하여 재조합 인체 부갑상선 호르몬의 분해를 90%이상으로 방지하여 완전한 형태의 부갑상선 호르몬을 고효율로 대량 생산하는 방법을 제공한다. 본 발명은 고농도 배양말기에 일어나는 재조합 단백질의 분해에 YPS1외에도 YPS2와 YPS3가 관여됨을 최초로 규명하여 신규성이 있으며 아울러 선행 발명에서 미처 해결하지 못한 배양 말기의 분해문제를 성공적으로 해결하여 진보성이 있다○사업성인체 부갑상선호르몬을 골다공증 치료제로 개발하기 위해 미생물 발현 시스템을 이용하여 재조합 hPTH단백질을 대량 생산하는 연구가 국내외로 활발히 진행.그러나 효모에서 분비 생산된 재조합 hPTH는 효모 숙주자체의 단백질 분해효소에 의해 절단되는 문제가 있었다. 이를 해결하기 위해 본 발명자들은 YPS1유전자가 파쇄된 효모 균주를 제작하고 이를 이용하여 플라스크 배양시 hPTH 분해가 방지되어 완전한 형태의 hPTH를 고수율로 생산할 수 있는 방법을 개발