일반기술

체세포 핵치환 복제수정란의 대량 생산 방법

본 발명은 핵이 제거된 성숙된 난자와 분화가 이루어진 체세포 유래 핵을 전기자극에 의해 융합하고 1～6시간 정도 난자의 재구성 시기를 부여한 다음 수득된 체세포 핵치환 복제수정란에 2차 전기자극을 주어 활성화시킴으로써, 핵치환 복제수정란이 착상 전단계인 부화 배반포기까지 효과적으로 발생할 수 있게 하는 체세포 핵치환 복제수정란의 대량생산방법에 관한 것이다. 따라서, 이러한 본 발명에 따르면 아직까지 성공하지 못한 돼지 복제의 필수적인 단계인 착상단계로 진입할 수 있는 결정적인 방법으로 활용될 수 있을 뿐만 아니라, 인공장기용 형질전환동물의 개발하는 데에도 활용될 수 있는 효과가 있다.○기술성 본 발명은 돼지 체세포 복제 수정란을 생산함에 있어 재구성 난자의 활성화 유기시 기존에는thimerosal/dithiothreitol 처리, 전기자극에 의한 융합 및 활성화를 동시에 유기하는 방법 등을 사용하였으나, 본 건에서는 전기자극에 의한 융합 후 1～2시간째에 재차 전기자극에 의한 새로운 활성화법을 개발하였다. 본 실험 방법에 따른 핵치환 난자의 배반포 단계까지의 발달율은 10.7%였으며, 이들 배반포의 평균 세포수는 30.4 ±10.4개로써, 기존 보고 된 5%미만의 발달율 및 15개 미만의 세포수 보다 월등히 뛰어난 결과로 보여 주었다. 이러한 발명은 아직 세계적으로 성공되고 있지 못하고 있는 체세포복제의 생산을 가능케 하고 인공장기용 형질전환돼지의 개발을 촉진할 것이다.○사업성 돼지 체세포를 이용하여 돼지를 복제하는 방법으로서, 향후 시장 진입 시 우수한 경쟁력을 확보할 수 있으며, 이에 따른 고부가가치 창출을 도모할 수 있다.