일반기술

핵산 혼성화 반응의 검출 방법

본 기술은 핵산 혼성화 검출방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 혼성화 핵산 또는 단일가닥 핵산에 선택적으로 결합하는 핵산 결합물질에 의한 핵산의 음전하 변화를 전기화학적인 방법으로 측정하는 것을 포함하는 핵산 혼성화 검출방법에 관한 것이다. 본 기술에 의한 핵산 혼성화 검출방법은 다음의 단계로 이루어진다.(1)작업 전극 위에 포획 프로브를 고정시켜 올리고 플레이트(oligo plate)를 제조하는 단 계(2)상기 포획 프로브에 목적 프로브를 반응시켜 혼성화 핵산을 제조하는 단계(3)핵산에 결합하여 전하를 변화시키는 핵산 결합물질을 혼성화 핵산 또는 포획 프로브 에 반응시키는 단계(4)전해질중에서 작업 전극의 전류 또는 전하량을 전기화학적 방법으로 측정하여 혼성 화 여부를 확인하는 단계DNA 칩 분야에서 DNA 혼성화의 검출은 가장 핵심적인 기술이다.현재 일반적으로 사용되고 있는 방법은 DNA 분자에 형광표지 분자를 결합시킨 후 레이저를 조사하여 야기되는 빛을 검출하는 레이저 유발 형광법이다. 레이저 유발 형광법은 현재 DNA 칩 제작 회사인 미국의 어피메트릭사(Affymetrix), 나노젠사(Nanogen) 등에 의해 상품화되어 있다. 그러나 레이저 유발 형광법은 DNA 자체에 형광을 유발할 수 있는 다른 분자를 결합해야 하는 번거로움이 있으며, 과정이 복잡하고, 형광분자 사용에 따른 고가의 비용이 요구된다. 최근에는 별도의 표지 분자를 DNA에 직접 결합시키지 않고 DNA 혼성화를 검출할 수 있는 방법으로 표면 플라즈몬 공명 (surface plasmon resonance)법, 수정체 미량 저울(quartz crystal microbalance)법, 질량 분석기를 이용한 방법, 및 전기화학을 이용한 방법 등이 이용되고 있다. 이러한 방법들은 DNA 자체에 직접 표지 분자를 결합시키지 않아도 검출이 가능하다는 장점을 지니고 있지만, 전기화학적인 방법을 제외한 나머지 방법들은 고가의 장비와 장비를 다룰수 있는 전문성이 요구되어 쉽게 이용하기 어렵다. 본 기술은 핵산의 혼성화 형성 유무를 전기화학적으로 검출할 수 있는 방법을 제공하여 DNA 칩 또는 바이오 칩에서의 검출방법으로 사용될 수 있다. 또한 본 기술은 기존 기술에 비하여 간단하고 저가의 비용으로 핵산 혼성화 유무를 검출할 수 있다.