일반기술

ＲＴ-ＰＣＲ을 이용하여 이산화탄소 가스 처리에 의한브라시카 과 식물의 자가불화합성 타파여부를스크리닝하는 방법

본 발명의 기술적 과제는 CO 2 가스처리에 각기 다르게 반응하는 다른 두 브라시카 캄페스트리스( Brassica campestris ) 라인인 733와 734를 비교 실험하여 달성할 수 있었다. 734라인은 CO 2 가스처리에 민감하여 자가불화합성타파가 용이하게 되는 반면 733라인은 그렇지 못한 둔감한 라인으로 밝혀졌다. 상기 실험에 의하여, 734라인의 자가불화합성 타파가 자가불화합성 관련 유전자인 SLG 유전자의 발현 감소를 수반하고 있음을 밝혀졌다.본 발명에서 또한 RT-PCR실험을 수행하여 734라인의 CO 2 가스처리에 대한 자가불화합성 타파와 S-유전자의 발현과의 연관성을 알아 볼 수 있었다. 두 라인의 주두에서 얻어진 mRNA를 주형으로하고 SLG 유전자의 염기서열에서제작된 프라이머로 수행한 RT-PCR 실험에서 CO 2 가스처리 후 734라인에서는 SLG 유전자의 발현 감소를 보이는반면 733라인에서는 별 다른 변화를 보여주지 않음을 발견하였다.따라서 본 발명의 RT-PCR을 유전자의 발현양을 측정하여, CO 2 가스처리에 의한 자가불화합성의 타파 여부를 좀더 빠르고 쉽고, 정확하게 스크리닝 할 수 있게되어 종자산업 발달에 이바지 할 수 있게 되었다.본 발명은 RT-PCR을 이용하여 유전자 발현양을 측정하여 브라시카 과(Brassica family)의 자가불화합성 타파 여부를 스크리닝하는 방법에 관한 것으로, 기존의 매개체를 이용한 수분 후 CO₂가스를 처리하여, 종자가 형성되는지 아닌지를 보거나 염색 후 현미경으로 관찰하는 방법들의 복잡하고 정확하게 확인할 수 없는 등의 문제점을 극복하고, 좀더 빠르고 쉽고, 정확하게 자가불화합성 타파 여부를 스크리닝하여 CO 2 가스처리 등에 의한 자가불화합성을 보다폭 넓게 종자 산업에 이용할 수 있는 효과가 있으므로 이는 종자 산업상 매우 유용한 발명이다.