일반기술

ＰＡＨ 노출 여부 진단용 바이오 마커 단백질

본 발명은 환경 유해 물질인 PAH(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons)에 노출되었을 때 바이오마커로 사용 될 수 있는단백질 개발에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 정상인의 혈액에는 없으나 PAH벤젠에 노출된 사람의 혈액에는 존재하거나정상인의 혈액에서 보다 PAH에 노출된 사람의 혈액에서 더 많이 발현되는 바이오 마커 단백질과 이를 이용한 PAH 노출여부 진단키트에 관한 것이다.본 발명에 따르면, 얻기 간편한 소량의 혈액으로부터 작업자의 PAH 노출 정도를 측정할 수 있을 뿐만 아니라, 이렇게 측정된 오염 정도로 PAH 노출자의 생리적인 상태를 파악 할 수 있다. 또한, 본 발명의 바이오마커 단백질을 기초로 제조된 단일클론항체는 immunoassay 키트 (ELISA, antibody coated tube test, lateral-flow test, potable biosensor)에 이용될수 있을 뿐만 아니라, 보다 높은 특이도와 민감도를 나타내는 항체의 개발을 통한 다양한 난분해성 오염물질 검출 스펙트럼을 갖는 단백질칩 개발에 이용될 수도 있다.상기와 같이 이차원 전기영동실험을 수행한 결과, 다음과 같이 PAH에 노출된 사람에서 새롭게 발현되거나 발현양이 증가하는 단백질들이 동정되었다.1. 새롭게 발현되는 단백질정상인 33명과 PAH에 노출된 작업자 48명을 대상으로 이차원 전기영동을 수행한 결과 PAH에 의해 새로이 발현되는 1개단백질을 찾아내었다(도 2). 상기 새로이 발현된 1개의 점(4981)을 MALDI-TOF/MS 분석하고 그 질량스펙트럼을NCBInr에 대해 ProFound 서치를 수행한 결과 trypsin-digested peptide 서열이 2개 (서열번호 1 및 2) 일치하여'putative capacitative calcium entry channel' (NCBI Accession No. CAC06090)로 동정되었으며 (도 5), 그 결과를 표1에 요약하였다.