일반기술

PTA - 210 세포주를 이용한 인간성장 호르몬의 생산 방법

* 주요 내용인간성장 호르몬의 과다분비(27.79μg/mℓ of blood이상) 환자의 뇌하수체조직을 체외에서 계대 배양하여 얻은 PTA-210 세포주(KFCC 10311)를 배양하여 세포내에 인간 성장 호르몬을 축적시킴을 특징으로 하는 인간 성장 호르몬의 생산 방법.* 고안배경인간 성장호르몬의 체외 생산 방법으로는 첫째, 사람의 뇌하수체 세포를 체외 배양하여 성장호르몬 분비세포를 고정하는 것으로 현재 보고된 바에 의하면 쥐의 뇌하수체 세포의 성립에 관한 성공예 밖에 없다.그외에 근래 유전자 조작에 의하여 효모나 세균으로 하여금 인간성장 호르몬을 생산하는 방법이 여러기관에서 연구되고 있으나 실용화 단계에는 거의 미치지 못하고 있을 뿐 아니라, 인체 적용에 세심한 조사가 필요하다. 따라서 현재 유일하게 이용되는 방법은 사체에서 뇌하수체를 적출하여 성장 호르몬을 정제하는 방법 뿐으로 이 방법은 가격이 매우 고가일 뿐 아니라 공급에 커다란 제한이 있다.그러므로 인체 성장 호르몬은 희귀성 및 고가로 성장기로 있으면서도 성장호르몬 결핍 아동들에게는 투여가 제한적일 수 밖에 없으며 이와같은 현상은 우리나라의 경우 더욱 심해 현재 성장호르몬을 투여받는 예는 한 두명에 불과하다.인간 성장호르몬의 희귀성은 성장에 대한 연구자체도 제한되어 호르몬 결핍아동 이외에 대한 효과도 보고된 바가 극히 드물다. 그러나 Gail Shiner(Research Resources Reporter. Vol. IV, No. 12, 1980)등의 5년 동안의 연구 결과에 의하면, 성장호르몬 결핍 아동은 물론 정상이지만 표준키에 미달하는 아동을 대상으로 하였을 때 24명중 10명이 강력한 반응을 보여 정상수준의 성장에 도달하였고 이는 성장호르몬의 공급이 가능하다면 인간 성장 호르몬의 주입 필요 대상은 건강한 아이일지라도 정상 수준에 미달하는 모든 아동에게 적용시킬 수 있다는 것이다.* 설명인간 성장호르몬의 생산 방법의 개발에 관한 긴요성을 더욱 강조한 것으로, 이에 본 발명자는 인간의 뇌하수체 세포의 정립에 착수하여 이중 한 세포주에서 인간 성장 호르몬을 생산하는 세포주 고정에 성공하므로써 이를 이용한 인간 성장 호르몬의 체외 생산을 가능케한 본 발명을 완성하였다.즉, 본 발명은 인간 성장호르몬의 과다분비(29.79μg/mℓ of blood 이상) 환자의 뇌하수체조직 0.7g을 시험관내에서 계대 배양하여 세포주를 고정하는데 성공, 이를 직접 배양하여 인간성장 호르몬을 체외에서 생산할 수 있는 방법을 제공하는 것이다.본 발명에서 사용된 세포주는 성장 호르몬 생산에 불가결한 크로모포브(Chromophobe) 세포와 알파세포의 혼합집단으로서 방사선 면역학적 정량 분석에 의하여 105 세포의 일일 성장 호르몬의 생산량은 450μg 이상인 것으로 확인되었으며 이를 본 발명자는 PTA-210 세포주라고 명명하였다.한편, 본 발명자는 PTA-210 세포주를 직접 배양하므로 해서 체외에서 인간 호르몬을 생산할 수 있음은 물론이고 PTA-210 세포주로 부터 유전자를 추출하므로써 유전공학적인 응용에도 사용할 수 있는 최적의 세포주임도 밝혀 내었다.