일반기술

단백질 제조와 세포용해를 동일계 내에서 수행하는 방법

유도인자에 의해 목적단백질의 발현이 유도되는 목적단백질의 유전자를 함유한 용원 파지 및 유도인자에 의해 완전한 파지입자를 형성할 수 있는 유전자를 함유한 용원 파지를 감염시켜 제조된 이중용원균주(double-lysogen)로부터 서로 다른 두 개의 유도인자로 각기 다른 단백질을 순차적으로 유도함으로써 세포내 목적 단백질의 제조와 세포용해를 동일계내에서 수행하는 방법이다. 파지를 포함하는 용원균주가 서로 다른 면역성을 갖는 또 다른 파지에 의해 재감염될 수 있다는 사실을 바탕으로 파지 이중용원 균주를 개발하고, 이중용원 대장균으로부터 각각 다른 단백질을 순차적으로 유도시켜 세포내 단백질 제조와 세포용해를 동일계내에서 수행할 수 있는 방법을 확보하였다.세포내 단백질의 제조와 세포용해를 동일계내(in-situ)에서 수행하는 새로운 방법으로서 이중용원 대장균으로부터 서로 다른 두 개의 유도인자로 각기 다른 단백질을 순차적으로 유도함으로써 수행하는 것이다. 유전자조작 기술에 의해 제조된 재조합단백질의 회수 시 선행되어야 할 배양액으로부터 세포분리 및 세포파괴공정이 생략됨으로써 간단히 회수할 수 있다.환경에 존재하는 독성을 제거하기 위해 이용되는 생물반응계에 응용될 수 있을 뿐 아니라 생물공정이 이용되고 있는 유동층(fluidized bed) 기술에 이용되어 고농도로 목적생산물을 원액의 배양액으로부터 직접 분리하는 데 응용될 수 있다.