일반기술

핵산 혼성화 반응의 검출방법

본 발명은 핵산의 혼성화 검출방법에 관한 것으로, (a) 작업 전극 위에 포획 프로브를 고정시켜 올리고 플레이트(oligo plate)를 제조하는 단계, (b) 상기 포획 프로브에 목적 프로브를 반응시켜 혼성화 핵산을 제조하는 단계, (c) 핵산에 결합하여 전하를 변화시키는 핵산 결합물질을 혼성화 핵산 또는 포획 프로브에 반응시키는 단계 및 (d) 전해질중에서 작업 전극의 전류 또는 전하량을 전기화학적 방법으로 측정하여 혼성화 여부를 확인하는 단계를 포함하는 핵산 혼성화 검출방법에 관한 것이다. 전극 표면에 고정되어있는 포획 프로브 핵산과 그에 상보적인 시료 핵산 간의 혼성화를, 핵산 결합 물질을 이용한 이중가닥 또는 단일가닥 핵산에 대한 특이적인 정전기적 중성화를 전기화학적인 방법으로 검출하는 핵산 혼성화 검출방법으로서, 상기 검출방법은, (a) 전극 위에 포획 프로브를 고정시켜 핵산 분자층을 형성시키는 단계; (b) 상기 고정된 포획 프로브에 시료 핵산을 반응시켜 전극표면에서 혼성화 반응을 유도하는 단계; (c) 상기 혼성화 반응시킨 전극 표면에 계면활성제와, 핵산에 결합하여 핵산의 음전하를 상쇄시키는 양전하성 핵산 결합물질을 동시에 또는 단계적으로 혼성화된 핵산 또는 혼성화되지 않은 포획 프로브에 반응시켜, 혼성화된 이중 나선 형태의 핵산 또는 혼성화되지 않은 포획 프로브 핵산의 전하량 또는 전하상태를 변화시키는 단계; 및 (d) 전극 표면의 전류 또는 전하량을 전해질 조건에서 측정하여 고정된 포획 프로브의 혼성화 여부를 확인하는 단계; 를 포함하는 핵산 혼성화 검출방법.