일반기술

레티노산에 의해 발현이 조절되는 재조합 리포터 유전자를 가지는 형질전환 세포주 및 이를 이용한 레티노산 유사물질 및 저해물질의 생물학적 검색방법

본 발명은 레티노산 (retinoic acid)에 의해 발현이 조절되는 재조합 리포터 유전자 컨스트럭트, 그의 형질전환 세포주 및 이를 이용한 레티노산 유사물질 및 저해물질의 생물학적 검색방법에 관한 것으로, 본 발명의 검색방법은 레티노산에 민감하게 반응하는 형질전환 세포주를 이용하므로 레티노산 유사물질에 의한 리포터 유전자 발현량의 증가와 저해물질에 의한 리포터 유전자 발현량의 감소를 통해 레티노산 유사물질 및 저해물질을 적은 비용으로 신속하고 간단하게 검색하는데 유용하게 이용될 수 있다. 1) 서열번호 1로 기재되는 염기서열을 갖는 TREpal (palindromic TRE)과 리포터 유전자가 융합된 유전자 컨스트럭트를 레티노산 수용체를 발현하는 세포주에 도입하여 형질전환 세포주를 제조하는 단계; 2) 상기 형질전환 세포주에 레티노산과 검색 대상 화합물을 처리하여 배양하는 단계; 3) 상기 배양액으로부터 단백질을 분리하는 단계; 4) 분리된 단백질에 리포터 유전자의 기질을 첨가하여 효소-기질 반응을 유도하는 단계; 및 5) 상기 효소-기질 반응에 의해 생성된 발광정도를 측정하는 단계를 포함하는, 레티노산 유사물질 및 저해물질의 생물학적 검색방법.