일반기술

대장균의 아세트산 대사경로를 부분 억제하는 안티센스 유전자를 포함하는 벡터 및 전기벡터로 형질전환된 대장균에서의 재조합 단백질 생산방법

본 발명은 대장균의 아세트산 대사경로를 부분 억제하는 안티센스 유전자를 포함하는 벡터 및 전기 벡터로 형질전환된 대장균에서의 재조합 단백질 생산 방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 본 발명은, 아세트산 생성에 관여하는 두 가지 효소인 아세트산 인산화 효소 A(acetate kinase A, ackA) 및 포스포트랜스아세틸라아제(phosphotransacetylase, pta)의 안티센스(antisense) 유전자 발현을 통해 아세트산 대사 효소의 발현을 mRNA 수준에서 부분 억제시키는 벡터 및 이를 이용한 재조합 단백질 생산방법에 관한 것이다.; 본 발명에 따르면, 재조합 단백질 생산용 대장균을 고농도로 배양할 때 2차 대사산물인 아세트산의 과량 배출로 야기되는 재조합 단백질 생산 저하 및 세포성장 저해 문제를 해결하여 기존의 방법과 달리 재조합 단백질의 종류에 관계없이 고수율로 발현시킬 수 있으며 공정적 접근방식에 의한 고비용의 문제를 근본적으로 해결할 수 있다. 또한, 포도당 배지로 인한 아세트산 배출에 의한 세포 성장 저해 및 단백질 생산성 저하를 해결함으로써 낮은 생산비로 고가의 단백질을 대량생산할 수 있는 경제적 파급효과가 클 것으로 기대된다. 서열번호 4의 염기서열로 표시되는 안티센스-ackA(antisense-acetate kinase A) 유전자.